Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制和促凋亡作用

摘要：

目的 探讨Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制和促凋亡作用.方法 利用脂质体将真核表达载体pIRES2-EGFP-Noxa瞬时转染至乳腺癌MCF-7细胞,通过RT-PCR检测转染后Noxa基因mRNA的表达,Western blot检测转染后蛋白的表达,MTT比色法测定细胞增殖的抑制,流式细胞仪检测细胞的凋亡和细胞周期的变化,Hoechst 33342染色检测细胞的凋亡情况.结果 Noxa基因转染后在乳腺癌MCF-7细胞中成功表达.转染后tuRNA及蛋白表达持续上升,其转染后24h、48h、72hmRNA的相对灰度值分别为(0.347±0.031)、(0.703±0.041)、(1.044±0.033),差异具有统计学意义(P<0.05).转染24h、48h、72h后蛋白表达的相对灰度值为(1.171±0.086)、(1.013±0.088)、(0.886±0.063),差异具有统计学意义(P<0.05).Noxa基因的表达使得乳腺癌MCF-7细胞出现增殖抑制,其24h、48h、72h抑制率分别为(23.9±4.2)%、(36.6±3.0)%、(47.0±3.3)%,差异具有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测显示MCF-7细胞DNA合成受到抑制,细胞周期主要抑制在G0/G1期.其转染24h、48h、72h的G0/G1,期分别为(68.1±2.5)%、(72.6±1.5)%、(75.6±0.9)%,与阴性对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);其24h、48h、72h凋亡率分别为(11.5±0.9)%、(19.6±0.8)%、(25.4±0.7)%,组间差异有统计学意义(P<0.05).Hoechst 33342染色显示Nora基因转染后细胞出现凋亡,其24h、48h、72h凋亡率分别为(7.3±4.1)%、(16.8±3.3)%、(23.8±2.3)%,与阴性对照组相比,其差异具有统计学意义(P<0.05).结论 NOXB基因转染乳腺癌MCF-7细胞后能够抑制细胞增殖并促进其凋亡.

关键词：Noxa基因、乳腺癌、转染、凋亡

所属期刊栏目：37

分类号：R737.9(肿瘤学)

在线出版日期：2010-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1104-1108