食管癌细胞NGAL基因-416～+84区段存在TPA反应元件

摘要：

目的本文旨在对NGAL基因启动子区及其附近是否存在TPA反应元件进行研究.方法 (1) 采用PCR法从食管癌细胞中克隆NGAL基因5′侧翼区-416～+84片段,然后分别插入质粒pGLB和pGLE, 构建pGLB-416和 pGLE-416荧光素酶报告基因表达载体; (2) 将pGLB-416和 pGLE-416分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109;(3) 用TPA刺激转染的EC109, 检测细胞相对荧光素酶活力,通过相对荧光素酶活力变化判定NGAL基因5′侧翼-416～+84区是否存在TPA反应元件, 同时进行生物信息学分析. 结果无论是pGLB-416还是 pGLE-416, 与pRL-TK共转染食管癌细胞EC109后,用TPA刺激,与其相应的空载体相比,转染细胞荧光素酶活力均极显著升高(t检验,P<0.01),约分别升高46.82和46.41倍;而TPA刺激组与没有TPA刺激组相比,pGLB-416和pGLE-416转染EC109细胞荧光素酶活力分别显著升高了5.17倍和7.37倍 (t检验,P<0.01).生物信息学分析显示,NGAL基因5′侧翼-416～+84区段至少存在4个潜在的TPA反应元件.结论食管癌细胞NGAL基因5′侧翼-416～+84区段存在着TPA反应元件.

关键词：NGAL基因、食管癌细胞、基因表达调控、TPA反应元件

所属期刊栏目：32

分类号：Q784;R735.1(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国科学院资助项目39900069;30170428;30370641;30570849;广东省博士启动基金20050560002;20050560003;国家自然科学基金37788;05104541

在线出版日期：2006-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：741-744