10.3971/j.issn.1000-8578.2005.06.001
NGAL基因5'侧翼区启动子区的克隆与鉴定
目的对NGAL(neutrophil gelatinase-associated lipocalin)基因5′侧翼区的转录调控启动子区进行分段定位鉴定.方法将NGAL基因5'侧翼区-416~+84和-152~+84两个区段分别克隆至专门用于研究启动子的报告基因表达载体pGL3-Enhancer(pGLE)中,构建表达载体pGLE -416和pGLE -152; 然后将pGLE -152和pGLE -416分别与pRL-TK载体共转染HeLa细胞、EC109细胞和Vero细胞,通过检测相对荧光素酶活力,确认这些NGAL基因片段中是否含有启动子元件.结果与pGLE相比,pGLE -152在上述三种细胞中的相对荧光强度均明显增强(P<0.05),且在不同的细胞中增强的幅度明显不同.结论 NGAL基因的启动子位于-152~+84区段内,启动子的强弱具有细胞特异性,这可能与增强子的协同作用相关联.
启动子、NGAL、肿瘤细胞、基因表达调控、荧光素酶
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Q784;R735.1(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金39900069,30170428,30370641;广东省自然科学基金37788,990799,010431
2005-07-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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