[目的]观察不同浓度右归饮含药血清对转化生长因子β1(tansforming growth factor,TGF-β1)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mes-enchymal stem cells,BMSCs)向软骨细胞分化的影响。[方法]密度梯度离心法分离培养大鼠BMSCs,取第3代,分为正常对照组、诱导对照组、右归饮高剂量组、右归饮中剂量组、右归饮低剂量组。正常对照组加入大鼠空白血清,诱导对照组加入诱导液(10 g·L-1 TGF-β1、10-7mol·L-1地塞米松、50mg·L-1维生素C)及大鼠空白血清,右归饮各组加入诱导液及相应的含药血清。14d后,进行甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色,采用Real time PCR检测Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖mRNA的表达。[结果]甲苯胺蓝染色及免疫细胞化学染色显示,正常对照组未见阳性细胞,诱导对照组及右归饮各组细胞均呈阳性。与诱导对照组比较,右归饮各组平均累积光密度值均增高(P<0.01),右归饮低剂量组高于高、中剂量组(P<0.01)。Real time PCR检测结果显示,与正常对照组相比,诱导对照组及右归饮各组Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖mRNA的表达均增高(P<0.01);与诱导对照组比较,右归饮各组Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖mRNA的表达均增高(P<0.01),其中右归饮低剂量组显著高于高、中剂量组(P<0.01)。[结论]右归饮含药血清能在一定程度上促进TGF-β1诱导的BMSCs成软骨细胞分化,低剂量组效果较显著。
骨髓间充质干细胞、软骨细胞、诱导分化、右归饮、转化生长因子β1
R331(人体生理学)
国家自然科学基金资助项目81373669;浙江省自然基金重点项目LZ12H270001;浙江省重点科技创新团队计划资助项目2011R50022-01;浙江省重点实验室计划资助项目2013E10024@@@@Fond PprojectsNational Natural Science Foundation of China81373669;Natural Science Foundation Project of Zhejiang ProvinceLZ12H270001;Zhejiang Leading Team of S&T Innovation2011R50022-01;Key Laboratory Project of Zhejiang Province 2013E10024