组蛋白去甲基化酶3调控SESN2介导的线粒体自噬在脓毒症心肌损伤中的机制研究

摘要：

目的 探讨组蛋白去甲基化酶3(JMJD3)调控SESTRIN2蛋白重组蛋白(SESN2)介导的线粒体自噬在脓毒症心肌损伤(SIMI)中的作用,并分析其机制.方法 20只SD大鼠按随机数字表法分为对照组和SIMI组,每组10只.SIMI组大鼠腹腔注射脂多糖(LPS)10 mg/kg(2mL/kg)构建脓毒症大鼠模型,对照组大鼠按2 mL/kg注射0.9％氯化钠注射液.采用HE染色检测大鼠心脏组织病理学变化,ELISA法测定大鼠血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)、TNF-α和IL-6水平,Western blot法测定大鼠心脏组织中JMJD3和SESN2蛋白表达水平.使用LPS(10 μg/mL)处理H9C2细胞48 h,构建脓毒症细胞模型,随机分为对照组、LPS 组、LPS+JMJD3 表达的小干扰 RNA(si-JMJD3)组、LPS+si-JMJD3+SESN2 表达的小干扰 RNA(si-SESN2)组、LPS+SESN2过表达(oe-SESN2)组和LPS+oe-SESN2+JMJD3过表达(oe-JMJD3)组.细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定细胞活性,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法测定细胞凋亡水平,ELISA法测定细胞培养上清液中TNF-α和IL-6水平,Western blot法测定凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X基因(Bax)]、自噬相关蛋白[微管相关蛋白轻链3(LC3)、重组人自噬效应蛋白(Beclin1)、选择性自噬接头蛋白(p62)]及JMJD3和SESN2蛋白表达水平.结果 与对照组比较,SIMI组大鼠心脏组织心肌纤维束排列松散,部分心肌纤维断裂溶解,伴有间质水肿和炎症细胞浸润.与对照组比较,SIMI组大鼠血清中cTnT、TNF-α和IL-6水平均升高,心脏组织中JMJD3蛋白表达水平升高,而SESN2蛋白表达水平降低(均P＜0.01).与对照组比较,LPS组细胞培养上清液TNF-α和IL-6水平升高,JMJD3蛋白表达水平升高,SESN2蛋白表达水平降低,同时,细胞活性减弱,凋亡水平增强(均P＜0.05).JMJD3敲低后SESN2蛋白表达水平升高,细胞活性增强,凋亡水平减弱,同时自噬水平增强(均P＜0.05),而进一步敲低SESN2后,以上趋势发生逆转.相反,SESN2过表达后,细胞自噬水平增强,细胞活性增强,凋亡水平减弱(均P＜0.05);而进一步过表达JMJD3后,SESN2蛋白表达水平降低,同时oe-SESN2对LPS-H9C2的作用能被oe-JMJD3逆转.结论 JMJD3通过调控SESN2介导线粒体自噬,促进心肌细胞损伤和凋亡,从而促进SIMI的发展.

关键词：组蛋白去甲基化酶3、SESTRIN 2蛋白重组蛋白、脓毒症心肌损伤、自噬

所属期刊栏目：45

分类号：R743.31;R541.61;R363

资助基金：浙江省医药卫生科技计划项目;浙江省中医药科技计划项目

在线出版日期：2023-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1798-1806,后插1-后插2