miR-26a-5p影响肝癌细胞迁移和侵袭的机制研究

摘要：

目的 探讨微小RNA-26a-5p(miR-26a-5p)对腹水来源的高转移人肝癌细胞系SK-HEP-1生物学行为的影响及机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测比较人正常肝细胞LO2及不同人肝癌细胞系(HepG2、BEL-7402、SMMC-7721、MHCC97H和SK-HEP-1)中miR-26a-5p和IL-6 mRNA的表达水平.选择低表达水平的SK-HEP-1细胞转染miR-26a-5p模拟物,采用qRT-PCR法和ELISA法检测转染后细胞中miR-26a-5p、IL-6 mRNA的表达水平和IL-6的分泌情况.划i痕和Transwell实验检测miR-26a-5p对SK-HEP-1细胞转移和侵袭能力的影响.双荧光素酶报告基因检测miR-26a-5p与IL-6 3'-非编码区(UTR)的靶向结合关系.Western blot法检测miR-26a-5p对SK-HEP-1细胞中信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白磷酸化和上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达变化.采用qRT-PCR法检测miR-26a-5p对EMT相关基因表达水平的影响.结果 与LO2相比,人肝癌细胞中miR-26a-5p相对表达量明显下调,IL-6mRNA相对表达量明显上调,其中SK-HEP-1中相对表达量差异最为显著.miR-26a-5p模拟物转染SK-HEP-1细胞后,miR-26a-5p相对表达量显著增高,IL-6 mRNA和蛋白相对表达量显著下调.双荧光素酶报告基因实验证实miR-26a-5p与IL-63'-UTR存在序列特异性靶向结合关系.与空白对照组和模拟物对照组相比,miR-26a-5p模拟物明显抑制SK-HEP-1细胞迁移和侵袭的能力,同时显著降低IL-6下游信号STAT3蛋白的磷酸化水平,升高E-钙黏蛋白相对表达量和降低波形蛋白相对表达量.与模拟物对照组相比,miR-26a-5p模拟物显著改变EMT相关基因表达.结论 miR-26a-5p通过靶向抑制IL-6mRNA,下调STAT3磷酸化,调控肝癌EMT标志物的基因和蛋白水平的表达,从而逆转肝癌细胞SK-HEP-1迁移和侵袭.

关键词：肝癌、微小RNA-26a-5p、IL-6、迁移、侵袭

所属期刊栏目：45

分类号：R730.21;R373.2;Q53

资助基金：江苏省中医药科技发展计划项目YB2020019

在线出版日期：2023-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：908-915