miR-106a对胶质瘤增殖和凋亡的影响及机制研究

摘要：

目的 探讨微小RNA(miR)-106a对人胶质瘤细胞中腺瘤样息肉(APC)基因的靶向调控作用以及对细胞增殖和凋亡的影响.方法 收集2020年1月至2021年12月浙江省立同德医院减压切除的10例胶质瘤组织和10例对照组织.采用实时荧光定量PCR法检测miR-106a在胶质瘤组织和对照脑组织中、在胶质瘤LN229、U251和U87等细胞系中的表达水平并作比较.使用miR-106a抑制物转染LN229和U251细胞,采用克隆形成实验检测细胞增殖能力,通过流式细胞术检测细胞凋亡水平.通过TOP/FOP荧光素酶实验检测荧光素酶活性,采用Western blot法检测Wnt通路相关蛋白和核内β-连环蛋白(β-catenin)的表达.采用qRT-PCR和Western blot法检测APC的mRNA和蛋白表达水平.利用双荧光素酶报告基因实验确认miR-106a和APC的靶向关系.通过表型拯救实验检测miR-106a靶向APC对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响.结果 miR-106a在胶质瘤组织和细胞系中高表达.抑制miR-106a表达降低胶质瘤细胞的增殖水平,提高胶质瘤细胞的凋亡水平,并抑制了Wnt/β-catenin信号通路的激活.miR-106a能够靶向APC的3'非编码区,抑制miR-106a后APC的mRNA和蛋白相对表达量均降低.拯救实验结果表明,抑制APC的表达可抵消miR-106a敲低对胶质瘤细胞增殖的抑制作用,并促进细胞凋亡.结论 APC是miR-106a的直接靶基因,miR-106a通过靶向APC激活Wnt/β-catenin信号通路调控胶质瘤增殖和凋亡.

关键词：微小RNA、胶质瘤、腺瘤样息肉基因、Wnt/β-catenin信号通路

所属期刊栏目：45

分类号：R735.2;G804.7;S826.2

资助基金：浙江省医药卫生科技计划项目2020KY503

在线出版日期：2023-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：342-349