10.12056/j.issn.1006-2785.2022.44.14.2022-193
lncRNARP11-680F8.1在肺癌组织中的表达及对肺癌细胞增殖和侵袭的影响
目的 分析长链非编码RNA(lncRNA)RP11-680F8.1在肺癌组织中的表达及对肺癌细胞增殖和侵袭的影响并探讨其作用机制.方法 通过GEPIA数据库分析RP11-680F8.1表达水平与肺癌患者总生存期和无病生存期的关系.收集2021年2月至2022年1月嘉兴市第一医院心胸外科手术切除的肺癌组织及相应癌旁组织32对,采用RT-qPCR法检测RP11-680F8.1在肺癌组织和肺癌细胞系(H1650、A549、HCC1588、H1299、HCC827)中的表达水平.选择RP11-680F8.1表达最高的肺癌细胞系为研究对象,分别转染抗RP11-680F8.1慢病毒(sh-RP11-680F8.1组)和非靶向对照慢病毒(sh-NC组).采用RT-qPCR验证慢病毒转染效率.分别采用CCK-8法和Transwell侵袭实验评价敲减RP11-680F8.1对肺癌细胞增殖能力和侵袭能力的影响.采用LncBase Predicted v.2软件和双荧光素酶报告基因实验探讨RP11-680F8.1和miR-195-5p之间的靶向关系.RT-qPCR法检测miR-195-5p和叉头框K1(FOXK1)mRNA表达水平,Western blot法检测FOXK1蛋白表达水平.结果 与RP11-680F8.1高表达患者相比,RP11-680F8.1低表达患者总生存期、无病生存期均较长(均P<0.01).与癌旁组织相比,肺癌组织中RP11-680F8.1表达水平明显上调(P<0.01).与正常肺泡上皮细胞系HPAEpiC相比,肺癌细胞系H1650、A549、HCC1588、H1299、HCC827中RP11-680F8.1表达水平均上调(均P<0.05),其中HCC1588细胞中RP11-680F8.1表达水平最高.与sh-NC组相比,sh-RP11-680F8.1组细胞中RP11-680F8.1表达水平明显降低(P<0.01).与sh-NC组相比,sh-RP11-680F8.1组细胞增殖能力和侵袭能力均降低(均P<0.01).双荧光素酶报告基因实验证实RP11-680F8.1的结合靶点是miR-195-5p.与sh-NC组相比,sh-RP11-680F8.1组细胞中miR-195-5p表达水平上调、FOXK1 mRNA表达水平下调(均P<0.01).结论 RP11-680F8.1在肺癌组织中高表达,敲减RP11-680F8.1后,通过上调miR-195-5p表达、下调FOXK1 mRNA表达,进而抑制肺癌HCC1588细胞的增殖和侵袭,提示RP11-680F8.1可能是肺癌治疗的潜在靶点.
肺癌、长链非编码RNA、miR-195-5p、细胞增殖、细胞侵袭
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R734.2;S826.2;Q78
浙江省中医药科技计划项目2020ZA114
2022-08-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1474-1480