NGF和PTEN双基因诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化效果观察

摘要：

目的 探讨神经生长因子(NGF)的过表达(NGFhigh)与10号染色体上的磷酸酶和张力蛋白同源物丢失(PTEN)的下调(PTENlow)相结合对大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)提升周围神经再生能力的影响.方法 将绿色荧光蛋白(GFP)标记的 OriCellTM SD大鼠MSC(MSC/GFP)分为两组,实验组通过NGF基因稳定转染和PTEN基因的小干扰RNA干扰瞬时沉默构建双基因修饰的NGFhigh/PTENlow大鼠MSC/GFP,对照组为未经基因修饰的大鼠MSC/GFP.采用细胞增殖/毒性检测试剂盒(CCK-8)和氧-葡萄糖剥夺实验检测两组细胞的增殖和凋亡情况;实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测两组细胞NGF、PTEN和巢蛋白-1(Nestin-1)mRNA和蛋白表达情况.结果 CCK-8检测结果 显示双基因修饰的NGFhigh/PTENlow大鼠MSC/GFP具有更强的增殖能力;氧-葡萄糖剥夺模型中NGFhigh/PTENlow大鼠MSC/GFP具有更强的生存能力;qRT-PCR和Western blot结果 显示,双基因修饰上调了NGF、Nestin-1的表达和下调了PTEN的表达.结论 双基因修饰的NGFhigh/PTENlow大鼠MSC/GFP具有更强分化为神经元样细胞的能力,因此,双基因定向诱导大鼠MSC分化有利于神经元再生,从而提升周围神经再生能力.

关键词：神经生长因子、10号染色体上的磷酸酶和张力蛋白同源物丢失、骨髓间充质干细胞、巢蛋白-1、分化和再生

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资助基金：上海市周围神经显微外科重点实验室、手功能重建卫生部重点实验室基金项目;浙江省实验动物科技计划项目

在线出版日期：2020-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1000-1005,后插2