SERCA2表达对哮喘大鼠气道平滑肌细胞分泌IL-8的影响

摘要：

目的 探讨哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)中肌浆/内质网Ca2+-ATP酶(SERCA2)的表达对IL-8分泌的影响.方法 建立卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘大鼠模型,分离原代ASMCs,分别用qRT-PCR及Western blotting、Fura PE-3/AM和ELISA法检测各组ASMCs中SERCA2表达、细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)和IL-8,利用siRNA技术下调SERCA2、毒胡萝卜素(TSG)抑制SERCA2以及吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)抑制NF-kB活化,检测不同状态下IL-8的变化.结果 与正常组比较,哮喘组SERCA2的表达减少,经缓激肽(BK)刺激的钙瞬变峰值明显下降,需更长时间重新摄取钙使[Ca2+]i恢复至基线水平,IL-8基础值和经IL-17刺激后的诱导值均增加(P<0.05或0.01).无论有无IL-17刺激,基因下调组IL-8 mRNA表达和分泌均显著增加(均P<0.01),与哮喘对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05).哮喘组IkBα磷酸化和NF-kB p65核转位均较正常组增加(P<0.05或0.01),基因下调组和TSG抑制组的NF-kB p65核转位亦增加(P<0.05或0.01),而使用PDTC后,基因下调组、哮喘对照组和正常对照组在IL-17刺激诱导下的IL-8 mRNA表达和分泌均减少(P<0.05或0.01).结论 哮喘大鼠ASMCs中SERCA2表达减少,导致钙稳态的改变,可能通过增强NF-kB活化来介导IL-8分泌亢进.

关键词：哮喘、气道平滑肌细胞、肌浆/内质网Ca2+-ATP酶、白介素-8

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资助基金：杭州市卫生科技计划一般项目2015A06

在线出版日期：2019-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1113-1118