10.12056/j.issn.1006-2785.2019.41.4.2018-2117
SRT1720抗老年大鼠骨髓间充质干细胞衰老的作用及机制研究
目的 探究SRT1720抗老年大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)衰老的作用及其机制并建立一种可行的预处理方案.方法 以CCK-8法检测细胞生存率,通过过氧化应激模型,确定SRT1720预处理方案.之后采用SRT1720预处理和溶剂DMSO预处理,以β-半乳糖苷酶染色法显示细胞衰老情况,荧光定量PCR法检测衰老相关的p16、p21 mRNA表达水平,Western blot法检测衰老相关的p16、p21蛋白表达水平.管腔形成试验分析预处理的细胞上清液重悬人脐静脉内皮细胞(HUVEC)管腔形成情况.采用活性氧检测试剂盒检测MSCs内活性氧类物质含量.免疫荧光法检测MSCs细胞内DNA损伤情况.结果 最适宜的SRT1720预处理方案为1μM SRT1720预处理老年MSC 24h,在此条件下,细胞在氧化应激条件下生存率最高,48h后衰老相关的β-半乳糖苷酶染色阳性率明显下降,细胞衰老相关的p16、p21 mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞上清液促HUVEC管腔形成能力增强,细胞内活性氧类物质含量减少,DNA损伤反应减弱.结论 SRT1720预处理可通过减轻细胞内活性氧类物质的产生及DNA损伤而改善老年MSC衰老表型及旁分泌功能.
老年骨髓间充质干细胞、衰老、SRT1720、过氧化物、DNA损伤
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浙江省医药卫生一般研究计划2013KYA142
2019-04-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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