SD大鼠骨髓间充质干细胞的分离及5-氮胞苷对其的诱导分化作用
目的:探讨SD大鼠骨髓间充质干细胞(SD- MSCs)体外分离的方法条件、生物学特性及5-氮胞苷对其的诱导分化作用。方法采用全骨髓贴壁法分离培养SD- MSCs,进行形态学观察,绘制生长曲线,流式细胞仪对其细胞周期进行分析,并通过成脂肪诱导鉴定,给予5-氮胞苷进行诱导分化,通过免疫组化和蛋白免疫印迹法,观察其对超极化激活环核苷酸门控的通道蛋白(HCN2)表达情况。结果 SD- MSCs以长梭形和多角形为主,呈放射状集落生长,细胞生长曲线呈S形,增殖能力比较活跃。成脂肪诱导后,细胞胞质内有大量橙红色脂滴形成。不同浓度的5-氮胞苷对SD- MSCs进行诱导分化后,7.5、10、12.5μmol/L5-氮胞苷诱导的HCN2表达阳性强度较高,其中10μmol/L的5-氮胞苷诱导24h的SD- MSCs HCN2表达强度最高。结论全骨髓贴壁法能够有效分离纯化增殖SD- MSCs,5-氮胞苷能够诱导其分化为HCN2表达阳性的细胞。
骨髓间充质干细胞、全骨髓贴壁法、5-氮胞苷
R65;R54
浙江省高层次创新人才培养项目02099
2014-05-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
497-500