抑制肾上腺髓质素基因的表达对卵巢癌细胞活性及化疗敏感性的影响

摘要：

目的通过构建靶向于肾上腺髓质素（AM）基因的shRNA并转染卵巢癌细胞，观察抑制AM基因表达对卵巢癌细胞活性及化疗敏感性的影响。方法体外合成针对AM基因的shRNA序列，亚克隆至载体pRNA- U6.1/neo中，构建重组质粒pRNA- U6.1/neo- AM shRNA，转染至卵巢癌细胞中；通过RT- PCR检测转染后细胞内AM mRNA转录水平；MTT法检测细胞增殖活性及对顺铂敏感性变化；Western blot检测细胞外调节蛋白激酶（ERK）活性以及金属基质蛋白酶-9（MMP-9）表达。结果 RT- PCR表明，转染后细胞内AM mRNA水平明显下降，与阴性对照组相比，有统计学差异（P＜0.05）；MTT法结果表明，下调AM的表达后细胞增殖受到抑制，用顺铂处理后，AM shRNA组细胞存活率下降最为显著，与阴性对照组相比，有统计学差异（P＜0.05）；Western blot结果表明，下调卵巢癌细胞中AM的表达，可以抑制ERK的活性及MMP-9蛋白的表达。结论利用RNAi及基因转染技术下调卵巢癌细胞中AM的表达可以明显抑制卵巢癌细胞的增殖、转移能力并提高其对化疗药物顺铂的敏感性。

关键词：卵巢肿瘤、肾上腺髓质素基因、RNA干扰、药物敏感性

分类号：R73;R58

在线出版日期：2013-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1551-1553,1556