SHARP-2特异的RNA干扰腺病毒载体的构建及功能鉴定

摘要：

目的 构建转录SHARP-2 基因特异性的小发夹RNA(SHARP-2-shRNA)的重组腺病毒(Rad-hSHARP),并观察其对正常大鼠肾细胞(NRK cell)SHARP-2基因的表达影响.方法 设计带有SHAPR-2特异性干扰序列的PDC316-SHARP-shRNA穿梭质粒与腺病毒骨架质粒pBHGloxdelE13cre 共转染293 细胞,并在293 细胞内进行同源重组,构建Rad-hSHARP.并使用实时定量RT-PCR在NRK细胞中对重组腺病毒干扰效果进行鉴定.结果 成功构建了特异性SHARP-2基因RNA 干扰的腺病毒载体系统,并有效抑制NRK 细胞中SHARP-2 基因的表达.结论 成功构建SHARP-2-shRNA 的Rad-hSHARP,为利用特异性沉默SHARP-2基因的腺病毒载体抑制T细胞增殖活化研究奠定基础.

关键词：RNA、干扰、小发夹RNA、SHARP-2、基因、腺病毒载体

所属期刊栏目：34

分类号：R73;S56

资助基金：国家自然科学基金资助项目30471641/H1006

在线出版日期：2012-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：173-176