哺乳动物耳蜗感觉上皮细胞长期培养体系的建立及临床意义

摘要：

目的 建立哺乳动物耳蜗感觉上皮细胞（CSEC）长期培养体系，为內耳毛细胞再生、分子及基因研究提供细胞来源.方法 取1d龄wistar大鼠耳蜗感觉上皮作组织块培养，有限稀释法纯化并得到CSEC单克隆细胞系.胰蛋白酶+胶原酶消化培养传代，传25代.取第25代CSEC，在倒置显微镜、透射电镜下对CSEC的生长特征、形态结构进行观察；免疫细胞化学检测细胞角蛋白18、波形蛋白，鉴定CSEC细胞来源.免疫荧光细胞化学、 RT-PCR检测毛细胞标志物Brn.3a 、Calretinin及AchRa9、Myosin Ⅶa mRNA的表达，鉴定CSEC特征.结果 第25代CSEC均呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态，细胞之间连接紧密，单层时呈"铺路石样"外观，可见"dome"结构；其可表达细胞角蛋白和不表达波形蛋白，微绒毛丰富，细胞间连接紧密，提示其为上皮细胞来源；并可表达毛细胞特征性标志物Brn3.a 、Calretinin及AchRa9、Myosin Ⅶa mRNA.结论 本实验成功建立了哺乳动物CSEC长期培养体系。长期培养的CSEC性状未发生明显改变，具有毛细胞前体细胞的特征.这为毛细胞再生的机制及内耳分子、基因研究提供了稳定的细胞来源.

关键词：耳蜗、感觉上皮、长期培养、毛细胞

所属期刊栏目：33

分类号：R76;R39

资助基金：国家杰出青年基金39925035;浙江省卫生厅基金资助2009b120;浙江省中医药管理局基金资助2009c13017

在线出版日期：2011-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：153-156,189