乙型肝炎病毒感染正常人肾小管上皮细胞的实验研究

摘要：

目的探讨正常人肾小管上皮细胞(HKC)对乙型肝炎病毒(HBV)的易感性.方法 (1)体外培养的HKC传至6孔板中,接种密度为1×106个/ml,孵育24 h后分受感染和阴性对照两组.受感染组加入0.5ml HepG2.2.15细胞上清液(已知该体外培养的细胞系可随细胞传代释放HBV病毒颗粒);阴性对照组加入0.5ml 10%FCS-DMEM/F-12培养液.两组HKC继续孵育72h,消化、离心沉淀,PBS清洗,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测两组HKC中的HBV DNA.(2)将HKC细胞传代并接种至2个6孔板中盖玻片上制作细胞爬片,接种密度为1×106个/ml,24 h后行HBV感染实验.然后将两个6孔板分别作为:(1)受感染组:往六孔板中加入制备好的感染用HepG2.2.15细胞上清液2ml;(2)阴性对照组:往六孔板中加入2ml;10%FCS-DMEM/F-12培养液.将HepG2.2.15细胞分别传代并接种至6孔板中盖玻片上制作细胞爬片,接种密度为1×106个/ml,24h后作为阳性对照组:往六孔板中加入2 ml 10%FCS-DMEM培养液继续孵育72h,原位杂交检测各组中的HBV DNA.结果实时荧光定量聚合酶链反应检测到受感染组HKC的基因组中HBV DNA的存在,受感染组HKC原位杂交检测HBV DNA阳性,呈核型.结论体外培养的正常HKC对HBV易感.

关键词：细胞培养技术、乙型肝炎病毒、感染、HepG2.2.15细胞

所属期刊栏目：32

分类号：R72;R73

在线出版日期：2010-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1148-1150,1256