人端粒酶逆转录酶诱导的猪肝细胞初步鉴定

摘要：

目的观察应用四步灌流法分离后原代猪肝细胞的数量和活力,初步鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)诱导的猪肝细胞的生物学特性.方法四步灌流法分离12只猪肝脏组织中的猪肝细胞,采用锥虫蓝拒染法测定其肝实质细胞数量和活力;将含hTERT真核表达的载体转染到原代猪肝细胞,经G418硫酸盐筛选,获得耐药性的猪肝细胞克隆并传代3代.观察原代猪肝细胞和hTERT诱导后的猪肝细胞的形态,检测两种猪肝细胞不同时期培养上清液中白蛋白、尿素氮的浓度.结果每只肝脏的肝细胞产量约为2.0×1010个,具有活力的肝细胞所占百分比为(95.5±3.2)%.原代猪肝细胞和hTERT诱导的猪肝细胞培养上清中分泌白蛋白和尿素氮在前3天无统计学差异(P＞0.05),第4、5天差异有统计学意义(P＜0.05).结论四步灌流法分离获取的猪肝细胞产量高、功能活性好.hTERT诱导的猪肝细胞具有正常肝细胞的基本功能,可作为生物人工肝及细胞移植等的理想的细胞源.

关键词：人端粒酶逆转录酶、猪肝细胞、生物人工肝支持系统、永生化

所属期刊栏目：28

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：国家科技攻关项目2003AA205150;国家科技攻关项目2004BA706B02-01

在线出版日期：2006-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：103-105,109