巴马香猪Hsp70基因的克隆、生物信息学分析及其在猪肠上皮细胞IPEC-J2中的表达

摘要：

为研究热应激蛋白70(HSP70)在巴马香猪(Sus scrofa domestica)耐热中的作用,利用NCBI公布的猪Hsp70基因序列设计引物,用RT-PCR克隆巴马香猪Hsp70基因.核酸序列分析表明,巴马香猪Hsp70基因开放阅读框(ORF)长1932 bp,编码643个氨基酸.该蛋白分子质量为71.1 ku,等电点(PI)为5.88,与野猪、人、牛、羊、犬和鸡的同源性分别为99.2%、82.8%、83.2%、83.6%、82.4%和77.7%.该蛋白非叶绿体转运肽和线粒体导肽,亦非信号肽分泌通道,存在多个明显的疏水区,其中397位疏水性最强,达2.211.将该基因的ORF与真核表达载体pcDNA 3.1/V5-His TOPO连接构建真核表达载体,并转染IPEC-J2细胞,荧光定量PCR及Western blot检测可见其在基因和蛋白水平的高量表达.

关键词：巴马香猪、Hsp70基因、克隆、真核表达

所属期刊栏目：37

分类号：Q786;S828(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金31101862,31472243

在线出版日期：2017-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：95-100