10.3760/cma.j.issn.1671-0290.2013.06.014
分泌型凋亡相关蛋白1调控成纤维细胞凋亡的研究
目的 探讨分泌型凋亡相关蛋白1 (secreted apoptosis-related protein 1,SARP1)调控增生性瘢痕患者的成纤维细胞(fibroblast,FB)凋亡的作用.方法 构建SARP1腺病毒载体(Ad-SARP1),感染瘢痕患者的皮肤FB,促进其表达SARP1蛋白,观察其蛋白表达后人FB增殖与凋亡的变化,明确SARP1蛋白对FB的调控作用,并通过转移酶介导的三磷酸脱氧鸟苷-生物素刻痕末端标记(TUNEL)方法、流式细胞仪(FACS)分析细胞增殖与凋亡动态变化.结果 成功构建Ad-SARP1,并能够感染人FB,通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测到SARP1的mRNA值明显增加,Western印迹方法检测SARP1蛋白表达明显增多(P<0.05);其蛋白表达后四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测,与带荧光的腺病毒空载体(Ad-EGFP)及对照组相比,Ad-SARP1感染的FB增殖活力均显著增高;TUNEL检测Ad-SARP1感染FB前后细胞凋亡结果显示,细胞凋亡明显受到抑制,凋亡阳性细胞变少,接近瘢痕成纤维细胞(HSFB)凋亡;FACS分析表明,感染组FB的细胞凋亡指数与对照组相比明显下降(P<0.01).结论 SARP1参与调控增生性瘢痕患者的FB功能,抑制细胞凋亡,促进细胞增殖加快.
成纤维细胞、细胞凋亡、增生性瘢痕、分泌型凋亡相关蛋白1
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R6;R733.7;R994.6
国家自然科学基金81071563
2014-02-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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