PEBP4通过对p53的调节作用降低A549细胞对DDP诱导的细胞毒性

摘要：

目的：检测肺癌细胞系A549中PEBP4的异位表达与顺铂（ DDP）诱导的细胞毒性之间的关系，并探讨其相关作用机制。方法构建pcDNA3-PEBP4重组质粒，转染肺癌细胞A549，检测各组A549细胞中PEBP4的表达。 MTT分别检测转染A549细胞，并在DDP作用48 h后，各组A549细胞活力的变化；检测各组A549细胞凋亡的变化和p53蛋白的表达变化。应用荧光素酶报告基因系统验证PEBP4是miR-34a的靶基因，并采用蛋白印迹法检测miR-34a对A549细胞中PEBP4蛋白表达的影响。结果 pcDNA3-PEBP4转染组PEBP4蛋白的表达显著高于正常对照组和PEBP4 shRNA转染对照组（ P＜0.01）。 DDP作用48 h 后， DDP 加药组的A549细胞活力显著低于正常对照组（ P ＜0.01）；pcDNA3-PEBP4转染组A549细胞活力低于正常对照组（ P＜0.05）；而PEBP4 shRNA 转染组细胞活力则显著低于正常对照组（ P＜0.01）和DDP加药组（ P＜0.05）。流式细胞仪检测结果和蛋白印迹法检测结果显示：DDP加药组的凋亡细胞数和p53蛋白的表达水平显著高于正常对照组（ P＜0.01）；pcDNA3-PEBP4转染组凋亡细胞数和p53的表达水平高于正常对照组（P＜0.05），却低于DDP加药组和PEBP4 shRNA转染组（P＜0.05）；而PEBP4 shRNA转染组凋亡细胞数和p53的表达水平则显著高于正常对照组（P＜0.01）和DDP加药组（P＜0.05）。荧光素酶报告基因系统检测结果显示：与对照组相比，转染miR-34a mimic组的相对荧光素酶活力显著降低（ P＜0.01）。在A549细胞中转染miR-34a mimic 48 h后，细胞中PEBP4蛋白的表达显著下降（ P＜0.01）。结论 PEBP4的过表达降低A549细胞对DDP诱导的细胞毒性的敏感性，这一过程主要通过影响p53蛋白的表达或miR-34a的调节来完成。

关键词：磷脂酰乙醇胺结合蛋白-4、人、肺癌、RNA干扰、顺铂、miR-34a

所属期刊栏目：32

分类号：R73;R5

资助基金：江苏省第四期“333工程”培养资金资助项目，吴阶平医学基金会临床科研专项资助基金课题320.6750.15031Fund program Foundation of the Fourth Stage of Jiangsu Province ＂333 project＂， Wu Jieping Medical Foundation 320．6750．15031

在线出版日期：2016-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：672-677