Wnt/BMP信号通路激活高效诱导人多能干细胞分化为血管平滑肌细胞

摘要：

目的 探讨体外采用无血清化学成分确定培养基诱导人多能干细胞(human pluripotent stem cell,hPSC)分化为血管平滑肌细胞的优化方案.方法 hPSC(H1/H9胚胎干细胞及诱导多能干细胞)采用无血清、化学成分确定的培养基进行单层培养,并依据诱导分化所使用的生长因子不同分为两组:A组采用骨形态蛋白4(BMP4)+激活素A(Activin A);B组采用BMP4+ Activin A +Wnt信号通路激活剂CHIR99021.在两组干细胞诱导分化后的第9天,流式分选获取的CD31+、CD34+血管前体细胞,并经PDGF-BB定向诱导分化为血管平滑肌细胞.采用免疫荧光染色及实时定量荧光聚合酶链式反应(real-time QPCR)对分化获取的细胞进行表型鉴定.结果 流式分选结果显示,B组诱导方案应用于3种多能干细胞时能获得38.8％～ 51.4％的CD31+、CD34+血管前体细胞,显著高于A组诱导方案的11.7％～22.5％ (P ＜0.05).两种诱导方案获得的血管前体细胞经定向诱导分化后,免疫荧光染色及real-time QPCR检测显示所有分化细胞均具有SM22-α、SMA-α、Calponin等肌源性标志的表达.结论 在采用无血清化学成分确定培养基培养条件下,同时激活BMP及Wnt信号通路可稳定、高效地将hPSC细胞诱导分化为血管平滑肌细胞,从而有望为细胞移植治疗提供“临床应用级别”的种子细胞.

关键词：多能干细胞、肌细胞,平滑肌、诱导、细胞分化

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在线出版日期：2016-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：550-553