10.3760/cma.j.issn.1001-4497.2006.02.020
人真核表达的质粒载体pLenti6/V5-DEST-Cx43的构建及鉴定
目的构建人真核表达的质粒载体pLenti6/V5-DEST-Cx43,为研究连接蛋白Cx43在心肌细胞间通讯、心脏胚胎发育及心肌细胞分化中的作用机制提供物质基础.方法从质粒p18-T上用限制性内切酶BamH1、Xho1切下Cx43 cDNA片断,进行琼脂糖电泳,割胶回收纯化;限制性内切酶BamH1、Xho1酶切质粒pENTR11,将线形化的载体与回收的Cx43 cDNA片断用T4 DNA连接酶连接,测序后通过LR反应克隆到慢病毒载体pLenti6/V5-DEST中.结果凝胶电泳和测序结果均证明已将人类Cx43 cDNA克隆到慢病毒载体pLenti6/V5-DEST中.结论成功构建了人真核表达的质粒载体pLenti6/V5-DEST-Cx43.
连接蛋白43、慢病毒属、真核细胞、基因表达
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R54(心脏、血管(循环系)疾病)
上海市科技发展基金02ZB14078
2006-05-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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