10.3760/cma.j.issn.1001-4497.2001.01.017
异丙肾上腺素预适应诱导热休克蛋白72改善兔心保存
@@ 缺血预适应的心肌保护作用已在众多动物实验,甚至临床试验中得到证实〔1〕,但将其应用于长期供心保存方面的报道还甚少。我们利用异丙肾上腺素制造预适应模型,观察其对长期供心的保存效果,现报道如下。
材料与方法 1.实验模型:20只健康成年新西兰白兔,随机分为对照组和实验组,每组10只。实验组用异丙肾上腺素(上海市天丰药厂)1 mg/kg,耳缘静脉缓慢静脉推注,自然恢复24 h后,采用改良Langendorff离体兔心灌注模型,工作心稳定15 min后测各项血流动力学指标;心脏停跳,4℃保存6 h后放入Langendorff装置上复跳,工作心稳定15 min后再记录各项血流动力学指标。
2.观察指标:保存前、后工作心记录期末心率(HR)、冠状动脉流量(CF)、左室收缩末期压(LVESP)、左室舒张末期压(LVEDP),计算心功能恢复率。取心尖前壁心肌0.5 g,加1.5 ml 生理盐水匀浆,取0.5 ml匀浆测定心肌酶学及一氧化氮(NO),剩余1 ml匀浆多次离心后取10 μl点滴NCM膜。干燥好的NCM膜经50 nmol/L左旋咪唑处理5 min后,依次加一抗[抗热休克蛋白72(HSP72)单克隆抗体(美国Grace公司,1∶500]、二抗[兔抗鼠IgG-碱性磷酸酶复合物、四唑盐(NBT)/5-溴-4-氯3-吲哚磷酸(BCIP)]底物显色至适当反应深度后水冲终止。岛津薄层扫描仪(波长560 nm)对斑点印迹信号进行扫描,行HSP72定量。取适量左室前壁心肌,常规石蜡包埋,切片,免疫组织化学方法显色、摄片,行HSP72定位。利用荧光分析法测定NO含量;测定心肌组织肌酸激酶同功酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH )、脂质过氧化物(LPO)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;测定心肌含水量。
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R654(外科学各论)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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