机械应力调控软骨细胞炎症反应中长链非编码RNA的机制研究

摘要：

目的 探讨机械应力调控软骨细胞炎症反应的作用机制.方法 体外分离培养新生SD大鼠软骨细胞,经白介素-1β3(IL-1β3)干预构建软骨细胞炎症模型,设置对照组(IL-1β)、2000μstrain组(2000μstrain应力+IL-1β)、5000μstrain组(5000μstrain应力+IL-1β),IL-1β浓度为5 ng/ml,以1 Hz应力干预2h.采用Real-time PCR和Western Blot检测Ⅱ型胶原(Col-2)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、自噬标记蛋白LC3、Beclin-1及m-TOR表达,同时检测MEG3表达,采用免疫荧光染色检测自噬小体形成;si-RNA沉默MEG3后,采用Real-time PCR检测LC3及Beclin-1表达.结果 2000μstrain组软骨细胞Col-2、LC3、Beclin-1基因及Beclin-1蛋白表达量均较对照组及5000μstrain组明显上调(P＜0.05);2000μstrain组软骨细胞MEG3基因表达量较对照组及5000μstrain组明显下调(P＜ 0.05);5000μstrain组m-TOR蛋白表达较对照组及2000 μ strain组明显增加(P＜0.05);应力组自噬标记蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ相对表达量均较对照组明显减少(P＜0.05);免疫荧光染色显示2000μstrain组自噬小体形成较对照组及5000 μ strain组明显增加,5000μstrain组自噬小体形成较对照组及2000 μ strain组明显减少(P＜0.05);si-RNA沉默MEG3后,发现LC3及Beclin-1表达量均明显增加(P＜0.05).结论 机械应力可影响软骨细胞LncRNA-MEG3表达,从而调控炎症环境中软骨细胞自噬水平.

关键词：软骨细胞、机械应力、自噬、MEG3

所属期刊栏目：39

分类号：R735.2;R392.11;X172

在线出版日期：2017-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：86-91