10.3760/j:issn:0529-5815.2001.04.022
pcDNA3-hBMP2转染对成纤维细胞 生物学性状的影响
目的 探讨人BMP2基因转染对成纤维细胞NIH3T3生物学性状的影响。 方法 构建重组真核表达载体pcDNA3-hBMP2,并在脂质体介导下,将其导入NIH3T3成纤维细胞。通过G418筛选获得阳性克隆,用细胞原位杂交和免疫组织化学方法检测hBMP2基因在NIH3T3成纤维细胞内的表达情况;MTT法和FCM检测pcDNA3-hBMP2转染成纤维细胞后对细胞增殖和细胞周期的影响,透射电镜观察转染pcDNA3-hBMP2后成纤维细胞超微结构的改变,碱性磷酸酶的检测观察转染pcDNA3-hBMP2后成纤维细胞向成骨细胞分化情况。 结果 转染pcDNA3-hBMP2后的NIH3T3细胞内有大量hBMP2mRNA的转录及其蛋白的表达;转染pcDNA3-hBMP2对成纤维细胞增殖和细胞周期无影响;转染pcDNA3-hBMP2后的成纤维细胞超微结构可见粗面内质网丰富,囊腔扩张明显,其内充满中等电子密度的蛋白分泌物;碱性磷酸酶活性显著上升。 结论 pcDNA3-hBMP2转染对成纤维细胞NIH3T3增殖和细胞周期无影响,转染后的成纤维细胞不仅可形成BMP2,而且具有向成骨细胞系分化的特性。
骨形态发生蛋白质类、转染、基因表达、成纤维细胞
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R3(基础医学)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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