棕榈酸诱导小鼠胰岛 β 细胞株MIN6细胞发生铁死亡的研究

摘要：

目的:探讨棕榈酸（PA）是否可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡。方法:将小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞分为正常对照组、PA组（1.0 mmol/L）、PA+凋亡抑制剂（Z-VAD-FMK）组（5 μmol/L）、PA+铁死亡抑制剂（Fer-1）组（5 μmol/L）、PA+坏死抑制剂（Nec-1）组（5 μmol/L），每组设置3个平行组。采用CCK8法检测细胞存活率，电镜观察细胞超微结构改变，FerroOrange试剂盒检测细胞内Fe
2+水平，丙二醛（MDA）试剂盒检测MDA水平，流式法检测活性氧（ROS）水平，实时荧光定量PCR法检测凋亡基因半胱氨酸蛋白酶3（
caspase3）、坏死基因受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3（
RIPK3）、铁死亡相关基因长链脂酰辅酶A合成酶4（
ACSL4）、花生四烯酸-15-脂加氧酶（
ALOX15）、前列腺素内过氧化物合酶2（
Ptgs2）、铁蛋白重链（
FTH）、铁蛋白轻链（
FTL）和谷胱甘肽过氧化物酶4（
GPX4）的mRNA表达水平，Western blotting法检测活化型caspase3（cleaved caspase3）、RIPK3、ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白表达水平。两组间比较采用
t检验。
结果:与PA组相比，PA+Z-VAD-FMK组、PA+Fer-1组和PA+Nec-1组MIN6的存活率均更高（
P<0.01）。PA组MIN6细胞电镜下可见凋亡、坏死、及铁死亡相关的形态学特征。与对照组相比，PA组MIN6细胞内Fe
2+相对荧光强度、MDA水平、总ROS均更高；
caspase3、
RIPK3、
ACSL4、
Ptgs2、
ALOX15的mRNA相对表达量均更高，
FTH和
GPX4的mRNA相对表达量均更低；cleaved caspase3、RIPK3、ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白相对表达量均更高（均
P<0.01）。与PA组相比，PA+Fer-1组Fe
2+相对荧光强度、MDA水平、总ROS均更低；
ACSL4、
Ptgs2、
ALOX15的mRNA相对表达量均更低，
FTH和
GPX4的mRNA相对表达量均更高；ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白相对表达量均更低（均
P<0.01）。
结论:PA可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡。

关键词：棕榈酸、铁死亡、MIN6细胞

所属期刊栏目：14

资助基金：国家自然科学基金81974103;National Natural Science Foundation of China81974103

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：490-497