二甲双胍对高尿酸诱导HepG2细胞脂质沉积的作用及其机制研究

摘要：

目的:探讨二甲双胍对高尿酸诱导HepG2脂质沉积的作用及其可能机制。方法:将HepG2细胞按照不同处理因素分为5组：对照组（不干预）、高尿酸组（12 mg/dl尿酸）、高尿酸+二甲双胍组（12 mg/dl尿酸+10 μmol/L二甲双胍）、高尿酸+二甲双胍+单磷酸腺苷酸活化的蛋白激酶（AMPK）抑制剂组（10 μmol/L AMPK特异性抑制剂Compound C预处理30 min 后，再加12 mg/dl尿酸+10 μmol/L二甲双胍）和高尿酸+二甲双胍+烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）抑制剂组（100 μmol/L NOX4特异性抑制剂Apocynin预处理30 min后，再加12 mg/dl尿酸+10 μmol/L二甲双胍），每组设置3个平行组。培养48 h后，油红“O”检测细胞脂滴分布，试剂盒检测细胞甘油三酯（TG）含量、线粒体内活性氧簇（ROS）和丙二醛（MDA）含量、黄嘌呤氧化酶（XO）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，实时聚合酶链反应检测细胞脂质合成相关基因的mRNA及线粒体NOX4 mRNA水平，Western blot检测细胞AMPK、p-AMPK及线粒体NOX4蛋白水平，免疫荧光检测线粒体内NOX4分布。组间比较采用单因素方差分析和
t检验。
结果:与高尿酸组相比，高尿酸+二甲双胍组HepG2细胞内脂滴数量减少，TG含量明显减少（
t=8.181，
P<0.05），线粒体ROS、MDA水平及XO活性降低，GSH-Px活性增加（
t=5.472~8.242，均
P<0.05），脂质合成相关基因mRNA表达降低（
t=7.835~11.013，均
P<0.05），AMPK蛋白的磷酸化水平显著增加（
t=7.000，
P<0.05），线粒体NOX4的mRNA及蛋白表达明显下调（
t=6.190、14.199，
P<0.05），差异均具有统计学意义。与高尿酸+二甲双胍组相比，高尿酸+二甲双胍+AMPK抑制剂组的上述作用减弱，高尿酸+二甲双胍+NOX4抑制剂组的上述作用增强，差异具有统计学意义（均
P<0.05）。
结论:二甲双胍可以减少高尿酸诱导的HepG2细胞脂质沉积，其机制与激活AMPK/NOX4信号通路、改善线粒体氧化应激有关。

关键词：二甲双胍、尿酸、肝细胞、线粒体氧化应激、代谢相关脂肪性肝病

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资助基金：湖北省自然科学基金2020CFB574;白求恩·默克糖尿病研究基金G2018030;中国糖尿病英才研究项目2020-N-01;Natural Science Foundation of Hubei Province2020CFB574;Bethune- Merck Diabetes Research FoundationG2018030;China Diabetes Young Scientific Talent Research Project2020-N-01

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：618-625