沉默小窝蛋白1对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响

摘要：

目的:探讨小窝蛋白1（Cav1）对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响。方法:通过慢病毒载体构建Cav1沉默的小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞株和小鼠原代胰岛（Cav1-shRNA组），以空载体病毒组作为对照组（Ctrl-shRNA），并设空白对照组，各组均分别加入脱脂牛血清白蛋白和棕榈酸（0.5 mmol/L）处理24 h及48 h，通过四甲基偶氮唑蓝比色法及Hoechst33342/碘化丙啶（PI）双染色法检测细胞活性及细胞凋亡，实时荧光定量PCR、Western blot检测凋亡相关的mRNA及蛋白表达水平。结果采用
t检验和单因素方差分析法进行统计学分析。
结果:与对照组比较，棕榈酸处理组的细胞存活率显著下降（0.89±0.10比0.24±0.04，
t=13.49，
P<0.01），P18、P19的mRNA和蛋白表达均上调（1.00±0.09比1.30±0.04、1.00±0.04比1.37±0.13，
t=5.28、4.71，均
P<0.05；0.87±0.04比1.48±0.05、1.02±0.06比1.41±0.07，
t=16.50、7.33，均
P<0.01）；含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase）-6、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平明显上调（1.00±0.04比1.57±0.08、1.01±0.15比1.57±0.20、1.02±0.19比1.57±0.09，
t=11.04、3.88、4.53，均
P<0.05），蛋白表达也明显上调（0.86±0.10比1.28±0.11、0.69±0.01比0.86±0.06、0.70±0.02比1.18±0.01，
t=4.89、4.84、37.18，均
P<0.01）。而Cav1-shRNA+棕榈酸组细胞存活率较Ctrl-shRNA+棕榈酸组显著上升（0.53±0.10比0.26±0.08，
t=4.71，
P<0.01），P19的mRNA和蛋白表达均下调（1.53±0.18比0.66±0.04、1.48±0.05比0.70±0.02，
t=8.17、25.09，均
P<0.01）；Caspase-6、Caspase-7、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平下调（1.82±0.11比1.03±0.07、1.43±0.24比0.42±0.15、1.41±0.22比0.51±0.18、1.45±0.18比0.42±0.13，
t=5.48~10.49，均
P<0.01），蛋白表达也下调（0.99±0.14比0.63±0.11、0.90±0.14比0.62±0.04、0.90±0.02比0.60±0.04、1.30±0.01比0.65±0.04，
t=3.50~27.31，均
P<0.01）。
结论:Cav1沉默可以通过影响胰岛β细胞Caspase家族，促进其增殖、减少棕榈酸作用下的β细胞凋亡，保护脂毒性下胰岛β细胞活性。

关键词：小窝蛋白1、细胞凋亡、细胞增殖、胰岛β细胞

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资助基金：国家自然科学基金面上项目51873071;广东省自然科学基金重点项目2018B030311012;广东省科技计划项目2017A020215026;广东省医学科研基金项目A2017314;National Natural Science Foundation of China51873071;Key Project of Guangdong Natural Science Foundation2018B030311012;Science and Technology Plan Project of Guangdong Province2017A020215026;Medical Science Foundation of Guangdong ProvinceA2017314

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：251-256