高糖对树突状细胞分化成熟和免疫功能的影响及其机制

摘要：

目的 探索树突状细胞(DCs)在高糖环境下分化、成熟、免疫功能的影响及其发生机制,以期进一步探索DCs在糖尿病肾病发病中的作用.方法 取小鼠骨髓单个核细胞,在含重组人粒?巨噬细胞集落刺激因子(rhGM?CSF,20 ng/ml)和重组人白细胞介素?4(rhIL?4,10 ng/ml)的完全培养基中培养,第7天收集不成熟DCs分别在含有5.5 mmol/L D?葡萄糖、30 mmol/L D?葡萄糖、30 mmol/L D?葡萄糖+100μg/ml核因子κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)的RPMI1640完全培养基中继续培养48 h后,采用流式细胞术检测DCs表型;以DCs为刺激细胞、同种异体T淋巴细胞为反应细胞按比例混合后,以混合淋巴细胞反应强度观察对树突状细胞抗原递呈、淋巴细胞增殖、淋巴细胞凋亡的影响;ELISA法检测细胞培养上清细胞因子浓度;Western blot检测核因子κB(NF?κB)活化程度.采用Student?t检验分析各组之间差异的显著性.结果 与正常对照组相比,30 mmol/L D?葡萄糖能明显增加DCs内NF?κB的活化(IκBɑ:0.29±0.18比0.69±0.79,t=-1.27;p65:0.87±0.18比0.35±0.13,t=2.19;均P<0.01),显著上调DCs表面标志CD11c、主要组织相容性复合体Ⅱ类分子、CD80、CD86、CD40的表达(t=8.97～10.45,均P<0.05),增强了T淋巴细胞的增殖作用(1:100时1.80±0.23比1.57±0.20,t=2.46;1:25时1.74±0.17比1.32±0.18,t=2.82;1:10时1.59±0.25比1.28±0.19,t=3.06;均P<0.05)、减低了T淋巴细胞的凋亡比率(12.0±2比44.0±12.3,t=4.03,P<0.05),并且促进DCs分泌细胞因子白细胞介素12(IL?12)、γ?干扰素(IFN?γ)、肿瘤坏死因子α(TNF?α)(t=3.68～7.68,均P<0.05);而NF?κB抑制剂PDTC则可不同程度阻断上述作用(均P<0.05).结论 高糖能够显著增加NF?κB的活化进而促进DCs的成熟,成熟DCs加速和放大了炎症免疫反应,这可能是DCs参与糖尿病肾病的重要机制之一.

关键词：糖尿病肾病、树突细胞、NF-κB、免疫炎症反应

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资助基金：湖北省自然科学基金2018CFB235;National Natural Science Foundation of Hubei Province2018CFB235

在线出版日期：2019-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：624-629