利拉鲁肽对人脐带间充质干细胞增殖、凋亡的影响

摘要：

目的：观察利拉鲁肽在人脐带间充质干细胞（HUC-MSCs）增殖、凋亡中的作用，进一步探讨其与磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶（PI3K/AKT）信号通路的关系。方法取生长于血清低糖杜尔伯科改良伊格尔培养基（DMEM/F12）中的HUC-MSCs以不同浓度的利拉鲁肽（分别为1.0′10-9、10-8、10-7 mol/L）以及空白对照分别干预24、48 h，细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒（CCK-8）检测HUC-MSCs增殖力，流式细胞术检测细胞凋亡率，探讨利拉鲁肽的最佳作用浓度及时间，进一步添加20μmol/L的PI3K特异性抑制剂LY294002，酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞上清液中环磷酸腺苷（cAMP）的浓度，Western blotting检测PI3K/AKT信号通路中磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶（p-AKT）、丝苏氨酸蛋白激酶（AKT）蛋白的表达水平。两组间数据比较采用独立样本t检验，多组间比较采用ANOVA方差分析。结果利拉鲁肽作用后，分别与1.0′10-9（0.52±0.10）、10-8 mol/L（0.68±0.07）组及对照组（0.44±0.09）比较，干预24 h后1.0′10-7 mol/L利拉鲁肽组（0.78±0.04）HUC-MSCs增殖力均明显升高（t=4.167~12.100，均P<0.05）；与1.0′10-9 mol/L组（3.295±0.346）及对照组（16.315±0.474）比较，1.0′10-7 mol/L利拉鲁肽组（1.380±0.255）HUC-MSCs凋亡率均明显降低（t=6.299、39.272，均P<0.05）；与对照组（0.646±0.015）、LY294002组（0.561±0.036）比较，利拉鲁肽组细胞上清液PI3K/AKT信号通路中p-AKT/AKT比值（0.77±0.023）增加（t=7.861、8.486，均P<0.05），cAMP的浓度明显升高（t=14.307、23.378,均P<0.05）；与利拉鲁肽组比较，利拉鲁肽+LY294002组细胞上清液中cAMP的浓度降低， p-AKT/AKT比值明显下降（t=16.473、3.172,均P<0.05）。结论利拉鲁肽可以促进HUC-MSCs增殖、抑制其凋亡，其发挥作用的最佳浓度和时间分别是1.0′10-7mol/L和24 h，其中机制可能与激活PI3K/AKT通路有关。

关键词：利拉鲁肽、人脐带间充质干细胞、增殖、凋亡

所属期刊栏目：9

分类号：R739.86;R692;R285.8

资助基金：福建省科技计划重点项目;福建省自然科学基金面上项目;全军医学科学技术研究十二五计划

在线出版日期：2017-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：41-45