微小RNA-92a抑制剂对高糖诱导的内皮细胞损伤的保护作用

摘要：

目的探讨微小RNA（microRNA，miR）92a抑制剂对高糖诱导的内皮细胞损伤的作用。方法分离原代人脐静脉内皮细胞（HUVECs），脂质体转染miR?92a抑制剂或阴性对照，采用5 mmol/L正常浓度葡萄糖或30 mmol/L葡萄糖刺激HUVECs 48 h后，分为4组：空白组（5 mmol/L葡萄糖），高糖组（30 mmol/L葡萄糖），阴性对照+高糖组（转染阴性对照+30 mmol/L葡萄糖处理），miR?92a抑制剂+高糖组（转染miR?92a抑制剂+30 mmol/L葡萄糖处理）。处理后，用荧光实时定量PCR法分析miR?92a水平，Hoechst染色观察细胞核改变，MTS观察HUVECs活力，Western blotting检测caspase?3和cleaved caspase?3蛋白表达。2组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果高糖组（30 mmol/L）HUVECs与空白对照组相比，miR?92a水平增加31%（1.31±0.37比1，t=1.93，P<0.05）。细胞数目减少，排列不规则，轮廓模糊。细胞核染色质浓缩凝集、边缘化，凋亡小体增加。细胞活力下降19%（81%±2%比1，t=-29.85，P<0.01），cleaved caspase?3/caspase?3增加24%（0.31±0.07比0.25±0.02， t=2.18，P<0.05）。miR?92a抑制剂+高糖组HUVECs与高糖组相比，形态损伤减轻，凋亡小体减少，细胞活力增加9%（88%±11%比81%±2%，t=1.82，P<0.05），cleaved caspase?3/caspase?3减少26%（0.23±0.03比0.31±0.07，t=-2.65，P<0.05）。结论 miR?92a抑制剂可缓解高糖诱导的内皮细胞形态损伤、活力抑制，减少caspase?3激活。miR?92a具有成为防治糖尿病血管并发症靶点的临床价值。

关键词：内皮细胞、微小RNAs、高糖、细胞活力、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

所属期刊栏目：8

分类号：R58;R85

资助基金：国家自然科学基金项目81471050、81270917Fund program:National Natural Science Foundation of China 81471050，81270917

在线出版日期：2016-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：299-303