活性维生素D3对糖尿病肾病大鼠维生素D受体及肾脏纤维化相关因子表达的影响

摘要：

目的 探索活性维生素D3对维生素D受体(VDR)不同表达水平的糖尿病肾病大鼠模型的保护作用及可能机制.方法 腹腔注射链脲佐菌素成功建立SD大鼠糖尿病肾病模型,将建模成功的36只大鼠随机分为3组(每组12只):VDR过表达组(肾脏原位注射含有VDR的慢病毒)、正常表达组(注射单纯载体)和低表达组(注射干扰VDR表达的慢病毒).在此基础上分别给予每组骨化三醇(即活性维生素D3,VD,0.03 μg·kg-1·d-1)治疗或花生油对照处理后,分为6组:VDR过表达+VD组、VDR过表达+花生油组、VDR干扰+VD组、VDR干扰+花生油组、空载体+VD组、空载体+花生油组.37d后采集标本,以实时聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化方法检测大鼠肾脏组织VDR表达,并进一步检测各组转化生长因子β-1 (TGF-β1)、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)和胶原蛋白1(COL-1)的表达情况.采用HE及Masson染色对大鼠肾脏形态结构及纤维化程度进行分析.采用单因素方差分析(ANOVA)及t检验法比较各组数据.结果 RT-PCR及免疫组化结果显示,与VDR过表达+花生油组相比,VDR过表达+VD组VDR和PTEN mRNA及蛋白表达均升高(t=-19.67、-5.18、-25.57、-10.06,均P＜0.01);与VDR过表达+花生油组相比,VDR过表达+VD组TGF-β1和COL-1 mRNA及蛋白表达均降低(t=15.62、8.20、28.28、5.81,均P＜0.01);与VDR干扰+花生油组相比,VDR干扰+VD组VDR和PTEN mRNA及蛋白表达量均升高(t=-53.67、-7.00、-19.81、-8.06,均P＜0.01);与VDR干扰+花生油组相比,VDR干扰+VD组TGF-β1和COL-1 mRNA及蛋白表达量均降低(t=12.0、8.50、21.22、5.42,均P＜0.01);与空载体+花生油组相比,空载体+VD组VDR和PTEN mRNA及蛋白表达均升高(t=-20.39、-5.46、-25.92、-6.38,均P＜0.01);与空载体+花生油组相比,空载体+VD组TGF-β1和COL-1 mRNA及蛋白表达量均降低(t=17.80、10.61、47.36、8.23,均P＜0.01);病理检查显示VDR表达越低组肾脏结构越紊乱、纤维化程度越严重.活性维生素D3干预后各组大鼠的肾脏结构及纤维化程度均可明显改善.结论活性维生素D3可通过VDR途径改善糖尿病肾病的肾脏纤维化.

关键词：糖尿病肾病、1、25-羟维生素D3、维生素D受体、转化生长因子β1

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分类号：R735.37;R285.5;R575.5

资助基金：国家自然科学基金81160116

在线出版日期：2016-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：676-683