促红细胞生成素对棕榈酸诱导肝癌HepG2细胞胰岛素信号通路活性的作用

摘要：

目的：研究促红细胞生成素（EPO）改善棕榈酸（PA）诱导肝癌HepG2细胞胰岛素信号通路活性的作用及机制。方法以PA（250 nmol/L）及EPO（10 U）或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖的组蛋白去乙酰化酶（SIRT1）激动剂白藜芦醇（Rsv,10 nmol/L）干预HepG2细胞，分为6组：对照组、胰岛素组（Ins）、PA组、PA+Ins组、PA+EPO组、PA+Rsv组；将含SIRT1的小干扰RNA（siRNA）转染HepG2细胞，再分为对照组、EPO组、EPO+阴性siRNA组、EPO+siSIRT1组及相应的PA干预组。Western blotting法检测胰岛素受体底物2（IRS?2）、磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）及SIRT1蛋白水平，定量逆转录多聚酶链反应（qRT?PCR）检测SIRT1基因变化。采用独立样本t检验进行两组间均数比较。结果与对照组比较（1.00±0.03），PA组的pIRS?2(Ser731)蛋白升高，pAKT（Ser473）、SIRT1蛋白水平降低（分别为1.25±0.06、0.77±0.02、0.74±0.03，t=6.048、-13.686、-10.649，均P<0.05）。经EPO干预后，与PA组相比，pIRS?2（Ser731）蛋白降低，pAKT（Ser473）、SIRT1蛋白水平升高(分别为0.70±0.03比1.00±0.11、1.60±0.14比1.00±0.08、1.39±0.03比1.00±0.03，t=-4.853、6.330、25.868，均P<0.05)。当使用siRNA下调SIRT1后，生理及PA状态下EPO激活HepG2细胞胰岛素信号通路的作用均被阻断。结论在PA处理的HepG2细胞中，EPO能够通过促进SIRT1蛋白表达，从而激活受损的胰岛素信号通路。

关键词：促红细胞生成素、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖的组蛋白去乙酰化酶、胰岛素信号通路、磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B、HepG2细胞

分类号：O65;R73

资助基金：国家自然科学基金81370947

在线出版日期：2015-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：382-386