胰淀素对脂肪变性人L-02肝细胞甘油三酯代谢的影响

摘要：

目的 研究胰淀素对脂肪变性人L-02肝细胞甘油三酯代谢的影响及其可能机制.方法 以人L-02肝细胞为实验对象,用含50％胎牛血清的高糖改良杜氏伊格尔培养基(DMEM)孵育肝细胞72 h,制备肝细胞脂肪变性模型.实验分为正常肝细胞组(A组)、脂肪变性肝细胞组(B组)、不同浓度胰淀素孵育脂肪变性肝细胞组:0.01 μmol/L(C组)、0.1μmol/L(D组),1μmol/L(E组)和5μmol/L(F组),胰淀素孵育时间为24 h.油红O染色观察每组肝细胞的形态和肝细胞内脂滴情况,甘油三酯定量检测试剂盒检测每组肝细胞内甘油三酯的含量,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测每组肝细胞内脂肪酸合成酶(FAS) mRNA和乙酰辅酶A羧化酶(ACC) mRNA的表达情况.进行正态性和方差齐性检验后,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果 用含50％胎牛血清的高糖DMEM培养基孵育肝细胞72 h后,肝细胞胞浆内充满大量红色脂滴,细胞内甘油三酯含量显著升高,说明肝细胞发生脂肪变性.A组甘油三酯含量为(415±52) mg/g蛋白,B组为(1129±96) mg/g蛋白(t=874,P＜0.05)；C、D、E、F组肝细胞内红色脂滴数量减少,甘油三酯含量分别为(898±77)、(740±83)、(515 ±30)、(628±48) mg/g蛋白(F =48.0,P＜0.05).RT-PCR结果显示肝细胞脂肪变性后细胞内FAS mRNA和ACC mRNA表达增加,分别是A组的(1.35 ±0.03)、(1.51 ±0.04)倍,差异具有统计学意义(t=47.2、62.9,P ＜0.05).不同浓度胰淀素处理后各组肝细胞内FAS mRNA和ACC mRNA表达有不同程度的下降.C、D、E、F组FAS mRNA的表达量分别是B组的(0.89 ±0.02)、(0.61 ±0.06)、(0.53 ±0.04)和(1.27±0.01)倍,与B组相比差异均具有统计学意义(t =16.2、58.7、70.4、41.2,均P＜0.05).当胰淀素浓度为5μmol/L时,FASmRNA表达水平较B组升高.C、D、E、F组ACC mRNA的表达量分别是B组的(0.74±0.02)、(0.66 ±0.01)、(0.49 ±0.02)和(1.46±0.05)倍,与B组相比差异均具有统计学意义(t=30.6、40.6、61.1、57.3,均P＜0.05).当胰淀素浓度为5μmol/L时,ACC mRNA的表达水平较B组升高.结论 胰淀素孵育脂肪变性肝细胞后肝细胞内甘油三酯含量下降,脂肪变性程度减轻,可能与肝细胞内FASmRNA和ACC mRNA表达水平变化有关.

关键词：胰淀素、肝细胞、甘油三酯

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在线出版日期：2014-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：112-115