红芪多糖对高糖条件下人脐静脉内皮细胞功能的影响

摘要：

目的 研究红芪多糖(HPS)对高糖条件下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)合成和释放一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的影响及作用机制.方法 从新鲜脐带中分离HUVEC进行鉴定、培养,细胞分为正常对照组、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)和HPS干预组.MTI比色法分析HPS对高糖诱导HUVEC增殖率的影响,流式细胞术Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,硝酸盐还原酶法检测上清液中NO的水平,分光光度法检测细胞内一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的浓度,酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清液中ET-1的含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、ET-1和c-Jun氨基末端激酶1(JNK1) mRNA的表达水平.组间差异显著性检验使用单因素方差分析,组间两两比较使用LSD法.结果 高糖组在6 h[(82.4±3.5)％]、24 h[(68.2±1.4)％]、48 h[(63.0 ±2.9)％]的细胞增殖率显著低于对照组(100％,P＜0.05)；HPS干预组细胞增殖率随浓度变化呈现先上升后下降的趋势,其中50 mg/L[(85.3±4.6)％]、100 mg/L[(89.6±1.1)％]、200 mg/L[(88.8±3.6)％]HPS干预组较高糖组增加,差异具有统计学意义(均P ＜0.05)；高糖组NO[(24.84±1.34) μmol/L]、NOS[(0.54 ±0.06) U/ml]含量较正常对照组呈现下降的趋势,iNOS[(0.133±0.015)U/ml]和ET-1[(0.740±0.070) ng/ml]含量则在各时间点均高于对照组,HPS干预组升高不同时间点HUVEC内NO[(23.20 ±0.55) μmol/L]、NOS[(0.46±0.10) U/ml]、以及降低iNOS[(0.08±0.020) U/ml]和ET-1[(0.710 ±0.030) μg/L]的变化,P＜0.05,使其趋向正常水平；HPS可提高高糖所致内皮细胞eNOS mRNA的水平[(0.33 ±0.02)比(0.23 ±0.04)],降低ET-1 mRNA的水平(2.28 ±0.31比2.79±0.29)；高糖组细胞内JNK1 mRNA水平表达(2.95±0.05)较正常对照组(1.00±0.00)显著增加(P＜0.05),而HPS干预组(1.45±0.05)则较高糖组(2.95±0.05)明显减少(P＜0.05).结论 HPS对体外高糖诱导HUVEC损伤具有保护作用,这一作用可能与抑制JNK信号通路有关.

关键词：红芪多糖、人脐静脉内皮细胞、高糖、一氧化氮、内皮素-1

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分类号：R541.4;R737.14;R285.5

资助基金：国家自然科学基金;甘肃省重点中医药科技项目

在线出版日期：2013-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：560-564