整合酶相互作用分子1基因对糖尿病下肢缺血性疾病的影响

摘要：

目的 检测整合酶相互作用分子1(INI1)基因在糖尿病大鼠下肢缺血性疾病血管中的表达,探讨其对血管内皮细胞影响的分子机制.方法 以8周龄的雄性SD大鼠为研究对象,通过尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的方法获得16只糖尿病大鼠模型,以完全随机分组方法将大鼠分为2组(每组8只):实验组部分结扎双侧股外动脉制作下肢缺血模型,对照组仅进行糖尿病造模,不作其他处理.以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting技术检测2组下肢动脉壁INI1的mRNA和蛋白表达情况.合成针对INI1的小干扰RNA(siRNA-INI1),并转染入人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC-12,对照组分别为无关序列转染及脂质体对照；应用噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell侵袭小室实验、RT-PCR、Western blotting等技术检测转染INI1-siRNA前后HUVEC-12细胞迁移及血管生成能力的变化,进一步检测迁移相关基因细胞间黏附分子1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制物1(TIMP-1)和血管生成相关基因血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管紧张素2(Ang-2)的变化情况.以t检验与方差分析做组间数据对比.结果 糖尿病下肢缺血大鼠的动脉壁内INI1 mRNA和蛋白表达均较对照组明显增加(分别为0.83±0.07、0.21±0.03和0.92±0.08、0.31 ±0.03,t=23.03、20.19,均P＜0.01)；转染后与脂质体及无关序列对照组相比,INI1-siRNA组HUVEC-12细胞INI1 mRNA及蛋白表达均显著降低(INI1mRNA分别为0.26±0.01、0.75 ±0.08、0.80 ±0.07,INI1蛋白分别为0.11 ±0.02、0.79 ±0.12、0.82±0.14,F =36.49、24.17,均P＜0.01)；INI1-siRNA组迁移能力明显增强(分别为66 ±5、35±3、37 ±5,F=19.39,P ＜0.01).与两对照组相比INI1-siRNA组HUVEC-12中ICAM-1、MMP-2、VEGF、bFGF和Ang-2的mRNA和蛋白表达明显增强(均P＜0.05),TIMP-1的mRNA和蛋白表达显著降低(F=36.48、237.91,P＜0.05).结论 INI1可抑制血管内皮细胞的迁移和血管生成能力,该效应可能是通过调控细胞中ICAM-1、MMP-2、TIMP-I、VEGF、bFGF和Ang-2的表达实现的.

关键词：糖尿病、外周血管疾病、内皮、血管、整合酶相互作用分子1

所属期刊栏目：5

分类号：R318;R735.2;R5

资助基金：国家自然科学基金;河北省卫生厅项目;河北省人事厅项目

在线出版日期：2013-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：162-167