内吗啡肽对糖基化终末产物致人脐静脉内皮细胞表达一氧化氮、一氧化氮合酶、内皮素1的影响

摘要：

目的 探讨内吗啡肽( EMs)对糖基化终末产物(AGEs)培养条件下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)合成分泌一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素1(ET-1)的影响.方法 体外制备AGEs修饰的牛血清白蛋白(AGEs-BSA)；分别用AGEs-BSA、EMs(1×10-5、1×10-6、1×10-7、1×10-8mol/L EM1或EM2)±AGEs-BSA及EMs(1×10-5 mol/L EM1或EM2)±纳洛酮±AGEs-BSA共同干预HUVEC,同时以只加BSA的HUVEC作为阴性对照.噻唑蓝(MTT)法检测各组HUVEC存活率；放射免疫法检测各组NO、eNOS水平；酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定各组ET-1表达量；实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组eNOS、ET-1 mRNA的表达.采用单因素方差分析及t检验进行数据统计.结果 与AGEs-BSA组相比,1×10-5mol/L EM1干预组HUVEC存活率增加,NO分泌量减少[分别为0.89 ±0.05 vs 0.67±0.02和(14.8±1.4)vs(23.0±0.7) μmol/L,t值分别为9.86、13.18,均p＜0.05],ET-1产生及其mRNA表达降低[分别为(0.85±0.01)vs(0.99±0.01)μg/L和10.6±0.7 vs 25.6±1.6,t值分别为31.36、50.18,均P＜0.05],eNOS活性及其mRNA表达增加[分别为(2.53±0.20)vs(0.61 ±0.09) U/ml和0.35 ±0.00 vs 0.05±0.00,t值分别为21.50、16.80,均P＜0.05],EM1其他浓度组和EM2各浓度组上述各指标与AGEs-BSA组比较结果相似,差异亦均有统计学意义(t值为2.24～102.4,均P＜0.05)；纳洛酮组上述指标与AGEs-BSA组差异无统计学意义(t值为0.56～2.05,均P＞0.05),而与各浓度EM1或EM2干预组差异有统计学意义(t值为2.24 ～64.96,均P＜0.05).结论 EMs可提高AGEs-BSA条件下HUVEC的存活率,降低NO、ET-1浓度,提高eNOS浓度；纳洛酮可阻断EMs的上述作用,提示EMs是通过μ阿片受体发挥作用的.

关键词：糖基化终末产物、高级、内吗啡肽、人脐静脉内皮细胞、一氧化氮、内皮索

所属期刊栏目：04

分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：国家自然科学基金30871087

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：365-369