恒河猴胰岛的半自动分离和纯化

摘要：

目的 探讨恒河猴胰岛分离和纯化的技术方法.方法 采用自制的半自动胰腺消化分离装置,对3只成年恒河猴胰腺进行消化分离,用非连续密度梯度高渗枸橼酸盐嘌呤溶液( HCA液)-蔗聚糖液(Ficoll液)纯化恒河猴胰岛,通过双硫腙染色在倒置显微镜计数胰岛的数量和纯度,用胰岛素释放试验检测胰岛的分泌功能.分离和纯化结果采用配对t检验进行统计分析.结果 消化后平均每个胰腺可获得( 101 420±12 054)胰岛当量(IEQ),纯化后平均每个胰腺可获得(71 480±8054) IEQ,平均每克恒河猴胰腺组织可获得(2310±252) IEQ,纯化后胰岛平均纯度为(89.8±8.7)％,活率为(93.1±2.8)％.纯化后的胰岛对葡萄糖刺激反应良好,高糖(16.7 mmol/L)时胰岛素的释放量为低糖(3.3 mmol/L)时的5.9倍(t=45.2,P＜0.01).分离胰岛在移植到糖尿病大鼠肾包膜下后能够影响降低血糖至支持水平.结论 通过采用半自动胰腺消化分离装置,胶原酶P灌注消化及非连续密度梯度法纯化,能获取较高纯度及生物活性良好的恒河猴胰岛.

关键词：胰岛、细胞分离、恒河猴

所属期刊栏目：03

分类号：R781.64(口腔科学)

资助基金：教育部新教师基金20094433120007;广东省自然科学基金面上项目9151051501000060;广东省医学科研基金A2010311

在线出版日期：2012-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：402-405