核糖体蛋白S6激酶1基因沉默对小鼠肝脏胰岛素抵抗的影响

摘要：

目的 探讨核糖体蛋白S6激酶1基因沉默对db/db小鼠肝脏胰岛素抵抗的影响及机制.方法 采用随机数字表法将24只9周龄健康雄性db/db小鼠(体质量44.5～48.2 g)随机分至对照组(n1=12)和实验组(n=12),实验组小鼠尾静脉注射核糖体蛋白S6激酶1短发夹RNA重组基因腺病毒,对照组尾静脉注射含U6启动子空载体腺病毒.注射病毒后第6天,对照组和实验组采用随机数字表进一步分为进食组(n=6)及空腹组(n=6).在进食和空腹状态处死小鼠,提取肝脏,应用Western blot法观测胰岛素受体底物-1和胰岛素受体底物-2蛋白表达水平.提取肝脏总RNA,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测糖异生基因mRNA表达水平.经尾静脉取血,采用酶联免疫吸附法测定胰岛素水平,采用比色法检测游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇水平.组间比较采用单因素方差分析.结果 与对照组相比,进食及空腹状态时,实验组胰岛素受体底物-1、胰岛素受体底物-2蛋白表达均增加.在空腹状态下,实验组与对照组相比,糖异生基因过氧化酶体增殖物受体共激活因子1α(分别为0.072±0.024和0.028±0.012)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(分别为23.8±4.0和12.3±2.4)、葡萄糖6磷酸酶(分别为3.0±0.8和1.5±0.4)mRNA表达均下降(F值分别为7.58、5.76、9.15,均P＜0.01).对照组和实验组胰岛素水平无显著差异(t=1.26,P＞0.05).空腹及进食状态下,实验组胆固醇水平低于对照组(F=15.48,P＜0.01).与空腹对照组相比,空腹实验组游离脂肪酸降低(t=2.56,P＜0.05).结论 db/db小鼠肝脏核糖体蛋白S6激酶1基因沉默后,空腹糖异生和血清游离脂肪酸水平下降,胰岛素受体底物-1和胰岛素受体底物-2蛋白表达增加,提示营养过剩条件下核糖体蛋白S6激酶1可能在肝脏胰岛素抵抗中发挥重要作用.

关键词：核糖体蛋白质S6激酶类、胰岛素、糖原异生、基因沉默

所属期刊栏目：03

分类号：R9(药学)

在线出版日期：2011-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：138-141