TaqMan荧光定量PCR检测HIV-1 DNA方法的建立及初步应用

摘要：

目的 建立基于TaqMan探针的HIV DNA荧光定量PCR检测方法 ,并检验其可靠性和稳定性.方法 选择HIV-1的保守区域LTR-gag设计引物和探针,构建质粒标准品,建立检测方法 ,对12份HIV-1阳性标本和5份HIV-1阴性标本进行检测.将检测结果 与罗氏HIV DNA定性检测试剂盒作比较.结果 荧光定量PCR体系的检测下限为50拷贝/μl,标准曲线的相关系数为0.99,斜率为-1.65,截距为39.80;12份HIV-1阳性标本,检出率为100%;5份HIV-1阴性标本,检测结果 均为阴性.该方法 与罗氏HIV DNA定性检测试剂盒检测结果 完全一致.采用不同方法 提取的DNA再行HIV DNA检测,其差异无统计学意义(t=0.033、P=0.974).结论 成功建立了一种HIV DNA的检测方法 ,具有快速、特异性强以及稳定性好等优点.

关键词：实时荧光定量PCR、TaqMan探针、人类免疫缺陷病毒

所属期刊栏目：11

分类号：TV1;TS9

资助基金：国家科技重大专项2014ZX10001003006

在线出版日期：2017-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：129-133