聚合酶链反应-高分辨率溶解曲线技术在常见沙门菌分型中的应用研究

摘要：

目的：建立沙门菌的聚合酶链反应-高分辨率溶解曲线（PCR-HRM）分型方法，结合DNA测序方法，比较PCR-HRM分型方法和血清学分型方法的一致性，评价该方法的临床应用价值。方法对全部32株沙门菌，先用传统的血清学分型技术进行分型，然后选择fljB、gyrB和ycfQ 3个基因为目的基因，用PCR-HRM技术对其进行分型，最后通过扩增上述3个目的基因并测序作为分型的金标准，比较血清学分型技术和PCR-HRM技术分型的一致率和正确率，分析两种方法不一致的可能原因。结果对32株所测沙门菌，血清学分型技术分出6个血清型，PCR-HRM分型技术分出5个曲线型，血清学分型技术和PCR-HRM分型技术的一致率为84.4%；以测序结果作为金标准，血清学分型技术的正确分型率为84.4%，PCR-HRM技术的正确分型率为96.9%，两种方法比较差异尚无统计学意义（P=0.156），但在本研究中PCR-HRM技术具有更高的分型正确率。结论 PCR-HRM分型方法具有简单、快速、灵敏度高和正确率高的优点，与传统的血清学分型方法具有良好的一致性，在建立标准操作规程之后，PCR-HRM技术在沙门菌分型中具有良好的应用价值。

关键词：聚合酶链反应、高分辨率溶解曲线、沙门菌、分型

分类号：R44;R74

资助基金：辽宁省科技攻关计划2011225021

在线出版日期：2015-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：409-413