低能量633纳米红光刺激对人表皮细胞株HaCaT增殖及活性氧水平的影响

摘要：

目的 观察低能量633 nm红光照射人表皮细胞株HaCaT后,细胞增殖活性及细胞内活性氧水平的变化. 方法 预实验选择照射距离.采用含体积分数10％ FBS、100 U/mL青霉素、100 μg/mL链霉素的RPMI 1640培养液常规传代培养HaCaT细胞.采用第3代细胞进行以下实验.(1)取细胞,按随机数字表法分为空白对照组和0.082、0.164、0.245、0.491、1.472、2.453、4.910、9.810 J/cm2照射组,每组3孔.空白对照组细胞不照光,后8个照射组细胞依次照633 nm红光10、20、30、60、180、300、600、l 200 s,每8小时重复照射1次.照射组照射48 h(6次)后,9组均用细胞计数试剂盒8和酶标仪检测细胞增殖活性(以吸光度值表示).(2)另取细胞,分组及照光方法同实验(1),照射组照光1次后9组均加入活性氧检测试剂,常规培养60 min.分别于培养后0(即刻)、30、60、120 min,采用酶标仪检测细胞内活性氧水平(以吸光度值表示).(3)另取细胞,按随机数字表法分为空白对照组,0.082、0.491、2.453、9.810 J/cm2照射组及阳性对照组.空白对照组和阳性对照组细胞不照光(阳性对照组另加入活性氧阳性对照试剂),照射组细胞按实验(1)方法照光1次.激光扫描共聚焦显微镜观察各组细胞内活性氧表达.对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析、t检验. 结果 (1)照射距离为10 cm.空白对照组以及0.082、0.164、0.245、0.491、1.472、2.453、4.910、9.810 J/cm2照射组细胞增殖活性分别为1.000、1.116±0.031、1.146±0.016、1.162±0.041、1.179±0.016、1.207±0.016、1.247±0.040、1.097±0.059、0.951±0.118.与空白对照组比较,0.082 ～2.453 J/cm2照射组细胞增殖活性明显增强(t值为-22.803 ～-6.779,P值均小于0.05).4.910、9.810 J/cm2照射组细胞增殖活性与空白对照组相近(t值分别为-2.854、0.711,P值均大于0.05).(2)培养后0、30 min,与空白对照组比较,0.164～ 2.453 J/cm2照射组细胞内活性氧水平明显增高(t值为-12.453 ～-4.684,P＜0.05或P＜0.01),0.082、4.910、9.810 J/cm2照射组细胞内活性氧水平无明显变化(t值为-3.925 ～-0.672,P值均大于0.05).培养后60 min,与空白对照组比较,0.082 ～2.453 J/cm2照射组细胞内活性氧水平明显增高(t值为-11.387～-4.717,P＜0.05或P ＜0.01).培养后120 min,与空白对照组比较,0.491 ～2.453 J/cm2照射组细胞内活性氧水平明显增高(t值为-10.657 ～-6.644,P＜0.05或P＜0.01).(3)与空白对照组比较,0.082、0.491、2.453 J/cm2照射组和阳性对照组细胞内活性氧的表达均增强.9.810 J/cm2照射组细胞内活性氧的表达较其他照射组明显减弱.各组细胞内活性氧均表达于线粒体中. 结论 低能量633 nm红光照射对人表皮细胞株HaCaT增殖具有促进作用,该促进作用与红光照射刺激细胞线粒体产生活性氧关系密切.

关键词：光刺激、细胞增殖、线粒体、红光、活性氧、HaCaT细胞

所属期刊栏目：32

分类号：R318;R711.31;R285.5

在线出版日期：2016-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：560-565