肌球蛋白轻链激酶介导缺氧后肠上皮屏障功能紊乱的研究

摘要：

目的 了解肌球蛋白轻链激酶(MLCK)在缺氧后肠上皮屏障功能损害中的作用.方法 建立单层肠上皮细胞缺氧模型,根据缺氧时间不同将细胞分为正常对照组(缺氧0 h),缺氧2、6、8、12、24 h组,(5-氯萘-1-磺酰)-1-六氢-1,4-双苯妥英钠(ML-9)处理组(缺氧6 h并用终浓度为100μmol/L的MLCK特异性抑制剂ML-9处理).用电阻仪测定单层肠上皮细胞跨细胞电阻(TER);免疫荧光法检测单层肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1的变化;蛋白质印迹法检测肠上皮细胞磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)及MLCK蛋白表达.结果 缺氧6、8、12、24 h组单层肠上皮细胞TER值分别为(422±17)、(427±27)、(403±40)、(426±22)Ω,均低于正常对照组[(451±27)Ω,P<0.05],ML-9处理组为(558±110)Ω,显著高于各单纯缺氧组(P<0.01).缺氧6 h组单层肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1发生明显改变,主要表现为不规则,出现明显皱褶、圆滑排列程度减弱,甚至有断裂及锯齿等不连续现象.ML-9组肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1近似于正常对照组,排列较规则,皱褶及锯齿状改变较单纯缺氧组减少或消失.各单纯缺氧组肠上皮细胞MLCK、p-MLC蛋白表达水平均较正常对照组增加.结论 MLCK可介导缺氧引起的肠上皮屏障功能紊乱.

关键词：缺氧、肌球蛋白轻链、肌球蛋白轻链激酶、肠上皮细胞、屏障功能

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分类号：R6(外科学)

资助基金：国家自然科学基金30571923;30670952;教育部留学回国人员科研启动基金2006-331

在线出版日期：2009-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：57-60