人参皂甙Rd对EAE模型小鼠Tregs/Th17细胞失衡的调节作用研究

摘要：

目的 探讨人参皂甙Rd对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠调节性T细胞(Tregs)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响. 方法 将54只6～8周龄雌性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为人参皂甙Rd组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、空白对照组,每组18只.前2组采用经典的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(Mog35-55)肽段免疫诱导方法制备成EAE模型,并在接种免疫后第13天起将人参皂甙Rd 40 mg/(kg-d)溶解于PBS中腹腔注射人人参皂甙Rd组(1次/d),PBS组和空白对照组予同等剂量PBS腹腔注射.各组小鼠于接种免疫后第1～20天每天进行临床症状评分,并于评分结束当天取小鼠腰髓进行组织病理学评估(炎症评分及脱髓鞘评分).在接种免疫后第20天,取各组小鼠脾脏,行体外脾细胞培养48 h后取上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)水平;采用流式细胞仪检测脾组织中Tregs细胞、Th17细胞的比例;取各组小鼠腰髓,采用实时荧光定量PCR检测腰髓中Janus激酶1(JAK1)、Janus激酶2(JAK2)、信号转导与转录激活因子3 (STAT3)、维甲酸相关孤核受体γt (ROR-γt)、叉头型基因p3 (Foxp3)mRNA的表达水平. 结果 (1)人参皂甙Rd组的临床症状评分、炎症评分均明显低于PBS组,差异均有统计学意义(P＜0.05).PBS组腰髓中有大量炎性细胞浸润及大片髓鞘脱失,而人参皂甙Rd组的髓鞘脱失较PBS组明显减少,2组间脱髓鞘评分比较差异有统计学意义(P＜0.05).(2)与PBS组相比,人参皂甙Rd组脾细胞培养上清液中IL-10水平明显升高,IL-17水平明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)与PBS组相比,人参皂甙Rd组脾组织中CD4+IL-17+细胞比例明显降低,CD4+CD25+Foxp3+细胞比例明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).(4)与PBS组相比,人参皂甙Rd组腰髓中JAK1、JAK2、STA T3、R OR-γt mRNA的表达水平明显降低,Foxp3mRNA的表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 人参皂甙Rd可通过改变与Tregs/Th 17细胞分化相关的Foxp3/RORγt/STAT3信号通路分子的表达,升高IL-10水平和Tregs细胞比例,降低IL-17水平和Th17细胞比例,从而改善EAE模型小鼠的临床症状.

关键词：人参皂甙Rd、实验性自身免疫性脑脊髓炎、调节性T细胞、辅助性T细胞17、细胞失衡

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资助基金：广东省医学科研基金A2015337;浙江省自然科学基金青年项目LQ19H090013Guangdong Medical Research FundA2015337;Zhejiang Natural Science Foundation Youth ProjectLQ19H090013

在线出版日期：2019-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：507-514