冷冻治疗对胶质瘤细胞凋亡影响的实验研究

摘要：

目的 探讨冷冻治疗诱发肿瘤细胞凋亡的原因. 方法 (1)将GL261胶质瘤细胞(1×107个/10 μL)注入C57小鼠背部皮下,建立荷瘤小鼠模型,肿瘤直径达15～20mm时将小鼠按随机数字表法分为冷冻治疗组(n=17)和假手术组(n=15),前者行冷冻手术治疗,后者只插入冷冻刀但不进行冷冻操作.术后2h提取冷冻肿瘤组织释放物;术后12h、24h TUNEL染色检测肿瘤组织凋亡情况;术后24h Western blotting实验检测肿瘤组织前体(pro)-Caspase-8、pro-Caspase-8、聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)的表达.(2)将GL261胶质瘤细胞分为冷冻释放物组、对照组,分别加入1倍浓度的冷冻释放物和等量DMEM,培养12h后TUNEL染色检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞上述凋亡相关蛋白的表达. 结果 (1)TUNEL染色显示术后12h冷冻治疗组小鼠胶质瘤组织切片S1区呈均一性坏死,S2区出现明显凋亡带(早发凋亡),术后24 h S1区呈均一性坏死,S2区凋亡消退,S3区近靶区侧出现一新发凋亡带(迟发凋亡).Western blotting检测显示,冷冻治疗组小鼠肿瘤组织S2区pro-Caspase-9和PARP蛋白的表达明显少于S1、S3、S4区,S3区pro-Caspase-8的表达低于S1、S2、S4区,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)TUNEL染色显示,与对照组比较,冷冻释放物组GL261胶质瘤细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P＜0.05).Westem blotting检测显示,与对照组相比,冷冻释放物组细胞pro-Caspase-8、pro-Caspase-9表达下降,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 冷冻治疗后肿瘤组织释放物具有诱发胶质瘤细胞凋亡的作用.

关键词：冷冻治疗、冷冻释放物、神经胶质瘤、凋亡

所属期刊栏目：14

分类号：R730.264(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81371397

在线出版日期：2015-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：794-798