Wilson病ATP7B基因重组腺病毒载体Ad-ATP7B的构建

摘要：

目的构建Wilson病基因ATP7B的重组腺病毒载体.方法分别以BamH Ⅰ+SalⅠ双酶切pcDNA3.0/ATP7B和pDC315,将ATP7B cDNA目的基因片段和线性化的pDC315连接,定向克隆构建pDC315/ATP7B,以PCR和酶切的方法鉴定.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞构建Ad-ATP7B,PCR进行鉴定. 结果经PCR和酶切鉴定证实pDC315/ATP7B构建成功.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞后见明显的毒斑,说明二者在293细胞中同源重组并包装成功.经PCR证实重组腺病毒Ad-ATP7B构建已完成.结论本实验成功构建了ATP7B外源目的基因序列完全正确的重组腺病毒载体Ad-ATP7B,为下一步采用ATP7B基因重组腺病毒载体对Wilson病进行基因治疗打下了基础.

关键词：肝豆状核变性、腺病毒载体、基因疗法

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分类号：R742.4(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金3040147,30370509;卫生部重大研究项目2001321;教育部留学回国人员科研启动基金2003406

在线出版日期：2005-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：541-544