表达IL -1ra的慢病毒载体的构建与鉴定

摘要：

目的 构建表达IL - 1ra的慢病毒载体,为神经前体细胞(NPCs)的基因修饰移植治疗脊髓损伤的研究提供基础.方法 从IL - 1ra质粒中克隆出IL -1ra基因,下游融合IRES2 - EGFP,装载于pLenti6.3 V5 - DEST中,获得含目的序列IL1ra - IRES2 - EGFP的慢病毒质粒,测序并包装；病毒感染HEK293细胞,通过GFP表达水平测定病毒滴度.并转染NPCs,观察NPCs的生长情况.结果 测序证实,用引物CMV -F和IRES2 -R扩增的质粒中IL -1ra的DNA序列与Genebank中序列完全一致；慢病毒悬液的滴度为3.5×106 TU/ml；NPCs转染重组慢病毒后且未出现生长特性的改变.结论 成功构建了表达IL - 1ra的慢病毒载体pLenti6.3- IL1ra - IRES2 - EGFP.

关键词：白细胞介素-1受体拮抗分子、慢病毒载体、基因修饰、细胞移植、脊髓损伤

所属期刊栏目：27

分类号：R651(外科学各论)

在线出版日期：2012-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1059-1063