脂质体介导EGFP基因转染神经干细胞实验研究

摘要：

目的用增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)的表达载体pIRES2-EGFP转染神经干细胞(neural stem cells,NSCs),检测该真核表达载体对NSCs的转染效率及EGFP的表达状态,为用NSCs为载体基因治疗中枢神经系统疾病提供实验依据.方法体外扩增、酶切鉴定pIRES2-EGFP质粒;悬浮培养NSCs;阳离子脂质体lipofectamineTM2000介导增强绿色荧光蛋白质粒转染NSCs;庆大霉素的氨基糖苷(G418)筛选重组子;荧光显微镜观察转染效率及表达情况;免疫细胞化学鉴定重组子.结果转染后6 h,荧光蛋白偶见表达,24 h表达量明显增加,48 h达到最高峰,1个月后抗性细胞有克隆球形成.结论脂质体介导报告基因-pIRES2-EGFP转染NSCs的方法简单、效率高、易成功,是一较为理想的基因转染方法.

关键词：增强绿色荧光蛋白基因、神经干细胞、基因转染、脂质体

所属期刊栏目：5

分类号：Q253(细胞生理学)

在线出版日期：2006-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：16-18