沉默NANOG基因表达对侧群表型肝癌干细胞化疗耐药的影响

摘要：

目的 观察沉默NANOG基因对侧群表型肝癌干细胞化疗耐药的影响,初步探讨提高肝癌化疗效果的新方法.方法 基于侧群(SP)细胞分选法,采用流式细胞术从肝癌细胞Hep3B中分选SP细胞和非侧群(NSP)细胞,通过特异性靶向NANOG基因的siRNA沉默SP细胞中NANOG基因表达,MTT法检测SP细胞对化疗药物阿霉素(DOX)的敏感性,实时荧光定量PCR(real-time PCR)和免疫印迹(Western blotting)检测NANOG和耐药相关基因ABCB1的表达.结果 (1)肝癌细胞Hep3B中分选的SP细胞比例为(13.3±1.8)%.(2)MTT法结果显示DOX处理后SP细胞存活率为(65.3±5.4)%,NSP细胞存活率为(41.2±4.7)%;SP细胞对DOX的耐药性高于NSP细胞(P<0.05).(3)NANOG和ABCB1 mRNA在SP细胞中的表达水平分别是NSP细胞的4.5、4.0倍;NANOG和ABCB1蛋白在SP细胞中表达水平分别是NSP细胞的4.2、3.6倍,差异均有统计学意义(P<0.05).(4)RNAi沉默NANOG表达后,siNANOG组SP细胞NANOG、ABCB1的mRNA和蛋白表达水平均较Mock组和siNC组明显下降(P<0.05),SP细胞对阿霉素DOX的耐药性显著降低(P<0.05).结论 NANOG基因在维持SP表型肝癌干细胞耐药性起重要作用,沉默NANOG表达后SP细胞耐药性受到抑制,可能与ABCB1表达下调有关.

关键词：肝肿瘤、肿瘤干细胞、NANOG、ABCB1、抗药性、肿瘤

所属期刊栏目：12

资助基金：国家自然科学基金青年科学基金资助项目81000889;广东省公益研究与能力建设专项资金项目2014A020212094;广东省自然科学基金 -自由申请项目2016A030313218;中山大学孙逸仙纪念医院逸仙起航项目YXQH201704

在线出版日期：2018-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：76-80