高尔基磷蛋白3表达在人结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶化疗耐药中的作用

摘要：

目的 探讨人结肠癌细胞HT29对5-氟尿嘧啶化疗耐药与高尔基磷蛋白3(Golgiphosphoprotein 3,GOLPH3)基因表达的关系及其机制.方法 将HT29细胞分为4组:对照组(HT29)、转染组(siRNA-GOLPH3)、实验组1(30 μmol/L 5-FU)、实验组2(siRNA-GOLPH3+30 μmol/L 5-FU).用RT-PCR和Western blot检测HT29细胞转染后的沉默效果;MTT和平板克隆实验检测各组HT29细胞增殖、成瘤能力;Western blot检测GOLPH3、P-糖蛋白、β-catenin蛋白的表达.结果 转染组与对照组相比,HT29细胞GOLPH3 mRNA(0.147±0.021比1.000±0.078,t=12.296,P＜0.01)和蛋白的表达量(0.077±0.399比1.003±0.235,t=6.723,P＜0.01)、吸光度A值(0.769±0.086比1.000±0.082,=3.885,P＜0.01)及成瘤能力(297±21比430±36,t=5.492,P＜0.01)均明显降低,差异均有统计学意义.实验组1、实验组2与对照组相比,吸光度A值(0.803±0.101比1.050±0.140,t=2.855,P＜0.05;0.242±0.091比1.050±0.140,t =9.664,P＜0.001)和成瘤能力(73±8比427±29,t=20.363,P＜0.001;305±22比427±29,t=5.840,P＜0.01)均显著降低,且实验组2的吸光度A值、成瘤能力明显低于实验组1(t=8.264,P＜0.001;t=17.346,P＜0.001),差异有统计学意义.与对照组相比(0.967±0.094、1.001±0.199、1.000±0.101),实验组1P-糖蛋白、GOLPH3、β-catenin蛋白表达量(3.634±0.574、2.424±0.261、2.324±0.418)均显著升高(t =7.944,P＜0.01;t =7.520,P＜0.01;t=5.330,P＜0.01),差异均有统计学意义,实验组2中这些蛋白表达量(0.520±0.176、0.466±0.159、0.933±0.049)较实验组1降低(t=8.983,P＜0.01;t=11.106,P＜0.001;t=5.724,P＜0.01),差异均有统计学意义.结论 GOLPH3基因表达可通过激活Wnt/β-catenin细胞信号通路参与HT29结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶化疗的耐药性.

关键词：结肠肿瘤、氟尿嘧啶、Wnt信号通路、P糖蛋白

所属期刊栏目：34

分类号：R735.3+7;R285.6;R392

在线出版日期：2019-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：704-707